胚胎工程的应用及前景(王永旭制作).ppt

* * * * * * 二、胚胎分割 切割同卵双驹 优势:可成倍增加胚胎数量，可以快速繁殖良种畜。 切割同卵双犊和三卵六羔羊 胚胎分割的基本过程 胚胎移入培养液 分割胚胎（机械法、酶处理） 移植胚胎给受体 着床产仔 良种繁育 良种牛 胚胎分割过程示意图 胚胎移植 将早期胚胎 细胞分散 2.特点：后代具有相同的遗传物质，克隆。 3.理论基础：动物胚胎细胞的全能性。 4.选择的胚胎： 发育良好的、形态正常的桑椹胚或囊胚。 5.使用的主要仪器及工具： 实体显微镜、 显微操作仪、 分割刀、 分割针。 6.具体操作： 用分割针或分割刀片将胚胎切开，吸出其中的半个胚胎，注入预先准备好的空透明带中，或直接将裸半胚移植给受体。 7.操作注意事项： ①对囊胚阶段的胚胎进行分割时，要将内细胞 团均等分割。 ②胚胎分割的份数越多，操作的难度会越大，移 植的成功率也越低。 在显微镜下 切割胚胎 取样滋养层 做DNA分析 性别鉴定 已知性别胚胎 胚胎移植 分割针 囊胚腔 透明带 滋养层 内细胞团 内细胞团 分割针 二分胚 牛胚胎性别鉴定和分割示意图 8.胚胎分割技术的缺陷 （1）刚出生动物的体重偏低，毛色和斑纹还存在差异； （2）采用胚胎分割技术产生同卵多胎的可能性是有限的。 旁栏思考题： 内细胞团一般到囊胚阶段才出现，它是发育为胚胎本身的基础细胞，其他细胞为滋养细胞，只为胚胎和胎儿发育提供营养。若分割时不能将内细胞团均等分割，会出现含内细胞团多的部分正常发育的能力强，少的部分发育受阻或发育不良，甚至不能发育等问题。 胚胎分割的份数越多，操作的难度会越大，移 植的成功率也越低。 早期胚胎的体积很小，只有在显微镜下才能看到；再者，细胞数目是有限的。分割的份数越多，不但难以做到均等分割，每一份的细胞数会越少，而且作为囊胚期的胚胎内细胞团细胞所受的影响会更大。因此，分割的份数越多，技术的难度会越大，移植后的恢复和发育的难度会越大，移植成功率自然会降低。 三、胚胎干细胞 1.概念：简称ES或EK细胞，是由早期胚胎或 原始性腺中分离出来的一类细胞。 内细胞团细胞 (ICM) 全能细胞 受精卵 囊胚 胎儿 胚胎干细胞分离途径示意图 生殖腺细胞 胚胎干细胞分离培养 2.特点: 1)形态：体积小、细胞核大、核仁明显。 2)功能：具有发育的全能性；可分化为成年动物体内 任何一种组织细胞；体外培养可增殖不分化。 3）在体外培养的条件下，ES细胞可以增殖而不发生分 化。对它可以进行冷冻保存，也可以进行遗传改造。 3.主要用途 (1)治疗人类的某些顽症 (2)培育出人造组织器官，用于器官移植 (3)是研究体外细胞分化的理想材料 (4)用于对哺乳动物个体发生和发育规律的研究。 全能干细胞 囊胚 受精卵 培养未分化 干细胞 全能性 神经细胞 血细胞 全能性 心肌细胞 8细胞胚胎 胚胎干细胞培养 × ♂ ♀ 分离早期胚胎 早期胚胎 转入培养皿中培养 分离内细胞团 胰蛋白酶处理解离 加饲养层细胞培养 胚胎干细胞 不加饲养层细胞培养 胚胎干细胞 细胞分化 从鼠的早期胚胎培养胚胎干细胞 胚胎干细胞核移植： 指把胚胎干细胞核移植到去核的卵细胞中，经过胚激活、胚胎培养、胚胎移植后直接由受体完成克隆动物的技术。 （繁殖多个个体） 1.右图是同学们到某良种场进行参观后，看到的胚胎移植繁育良种奶牛的技术流程示意图。请看图思考并讨论以下各题。 （1）用文字完成下面的流程图。 思考与探究 对供、受体母畜进行选择，并进行同期发情处理 处理供体母畜 配种或人工授精 收集胚胎 对胚胎检查培养或保存 胚胎移植 对受体母畜进行 是否妊娠的检查 对受体母畜进行 是否妊娠的检查 良种奶牛后代 ① ⑦ ⑥ ⑤ ④ ③ ② 1.右图是同学们到某良种场进行参观后，看到的胚胎移植繁育良种奶牛的技术流程示意图。请看图思考并讨论以下各题。 （1）用文字完成下面的流程图。 思考与探究 （2）应该怎样选择供体公、母牛和受体母牛？在②中，为什么要用促性腺激素处理供体母牛，在促性腺激素处理供体母牛前，为什么需要对供体和受体母牛进行同期发情处理？ 供体公、母牛应该是具有人类所需的优良遗传性状的个体，而受体母牛必须具有正常的孕育、生殖后代的能力； 需要用促性腺激素处理供体母牛是为了引起超数排卵，这样就可以获得较多的胚胎； 在促性腺激素处理供体母牛前，对供体和受体母牛进行同期发情处理，才能使它们的生理条件达到同步或一致，使供体的胚胎移入受体后有相同或相似的生存条件。 （3）在右侧的流程图中，哪一步需要进行冲卵？冲卵是把母畜的卵子冲