芹菜衔接蛋白基因AgMu2的克隆与表达分析.doc

园 艺 学 报 2014，41（7）：1369–1378 http: // www. ahs. ac. cn Acta Horticulturae Sinica E-mail: yuanyixuebao@126.com 收稿日期：2014–03–12；修回日期：2014–05–08 基金项目：国家自然科学基金项目；教育部新世纪优秀人才支持计划项目（NCET-11-0670）；江苏省杰出青年基金项目 （B；江苏高校优势学科建设项目（2011PAPD）；江苏省双创计划项目（2011JSSC） * 通信作者 Author for correspondence（E-mail：Xiongaisheng@） 芹菜衔接蛋白基因 AgMu2 的克隆与表达分析 王广龙，王 枫，徐志胜，蒋 倩，谭国飞，熊爱生* （南京农业大学园艺学院，作物遗传与种质创新国家重点实验室，农业部华东地区园艺作物生物学与种质创制重点 实验室，南京 210095） 摘 要：为研究芹菜（ Apium graveolens ）衔接蛋白（Adaptor protein）复合体AP-2中的μ2亚基的功 能，以‘六合黄心芹’和‘美国西芹’为试验材料，采用RT-PCR方法获得 AgMu2 基因。序列分析表明： AP-2复合体 AgMu2 基因全长1 317个核苷酸，编码438个氨基酸。推测其蛋白质分子量为49.30 kD，pI 为9.28。进化分析表明，来自‘美国西芹’的AgMu2亚基在植物间进化具有高度保守性，与葡萄Mu2 进化关系最为接近。空间结构分析表明，从芹菜中分离的AgMu2亚基由5个螺旋和26个延伸主链构成， 两个平行的β延伸主链构成的平面区域可能含有识别YXXΦ结构的位点。实时定量荧光PCR显示，芹菜 中 AgMu2 基因主要在叶中表达，具有明显的组织特异性，同时该基因可响应低温、高温、干旱和盐胁迫 等多种逆境信号，2个品种间该基因响应的时间和强度也具有显著的差异，显示了该基因功能的多样性。 关键词：芹菜；AP-2复合体； AgMu2 基因；克隆；实时定量PCR；基因表达 中图分类号：S 636.3 文献标志码：A 文章编号：0513-353X（2014）07-1369-10 Cloning and Expression Profile Analysis of the AgMu2 Gene of Adaptor Complex from Celery WANG Guang-long，WANG Feng，XU Zhi-sheng，JIANG Qian，TAN Guo-fei，and XIONG Ai-sheng* （ State Key Laboratory of Crop Genetics and Germplasm Enhancement ， Ministry of Agriculture Key Laboratory of Biology and Germplasm Enhancement of Horticultural Crops in East China ， College of Horticulture ， Nanjing Agricultural University ， Nanjing 210095， China ） Abstract：To investigate the functions of the μ2 subunit of adaptor protein complex from celery （ Apium graveolens ），the gene AgMu2 ，encoding the μ subunit from AP-2 complex，was isolated from two celery cultivars‘Liuhe Huangxinqin’and‘Meiguo Xiqin’by RT-PCR method. Sequence analysis indicated that the length of AgMu2 gene was 1 317 bp，which encoded 438 amino acids. It is predicted that the molecular mass of its protein was 49.30 kD，and pI was 9.28. Amino acid s