菌种生产.ppt

菌种生产 尤昌建 食用菌菌种分为母种、原种和栽培种三级，也有人将其分别称作一级种、二级种和三级种。母种是生长在试管琼脂培养基上的菌种，所以，也常称作试管种。原种是以母种为接种物生长在天然基质上的菌种。栽培种是以原种为接种物，生长在天然基质上的菌种。下面将分别介绍这三级菌种的制做方法。 一、母种的制作 母种的制做程序包括：培养基制备→接种→培养(检查菌种生长情况)→成品。 1.培养基的制做 培养基质是食用菌菌种生长所需的全部营养所在，培养基要具备四个主要条件： 第一，要含所有培养菌种生长所需要的营养物质，如糖类、有机氮、无机盐等。 第二，所含营养物质及其之间的比例要适当，以利于生长，如多数食用菌要求培养基中葡萄糖的浓度在2％左右，过高或过低都不利于菌种的生长，但是，猴头则需要较高的麦芽糖浓度，否则极易在试管斜面上形成子实体。 第三，要有适宜的酸碱度(pH值)。只有在适宜酸碱度的培养基上菌种才能正常萌发和生长，如多数食用菌的适宜酸碱度在5.0～6.5，喜酸的种类如猴头，其适宜的酸碱度则在4.8～5.5； 第四，经过严格灭菌，保持无菌状态。这必须通过灭菌才能达到。培养基的灭菌多采用高温湿热高压灭菌方法。然而，灭菌过程中的高温能破坏许多化学成分，并使培养基的pH值下降。因此，培养基的配制要尽量选择使用热稳定性好的化学试剂，灭菌前的培养基酸碱度要略高于使用时需要的适宜酸碱度。一般高压灭菌30分钟，培养基的pH值下降0.1～0.3。 从总体上看，食用菌对营养的要求，大同小异。当然，不同种类之间对某些养分又有着各自的要求。因此，也就有了通用培养基和专用培养基的区别。在具体介绍培养基制做方法之前先介绍几类常用的培养基配方。 ①通用培养基 适于香菇、平菇、木耳、毛木耳、金针菇、滑菇、姬菇、鸡腿菇等多数食用菌，不适于双孢蘑菇、大肥菇、灰树花、柱状田头菇、阿魏侧耳等有特殊营养要求的种类。 配方一：PDA培养基马铃薯(去皮)200克，葡萄糖20克，琼脂10或20克(视琼脂质量而定)水1000毫升。 配方二：PDA综合培养基马铃薯(去皮)200克，葡萄糖20克、磷酸二氢钾2克、硫酸0.5克、琼脂10克或20克、水1000毫升。 配方三：PDA麦麸综合培养基马铃薯(去皮)200克，麦麸50克、葡萄糖20克，磷酸二氢钾2克，硫酸镁0.5，琼脂10或20克，水1000毫升。 ②银耳培养基(培养纯菌丝用) 配方一：黄豆饼粉蔗糖培养基黄豆饼粉40克，蔗糖20克，琼脂10克或20克，水1000毫升。 配方二：米粉蛋白胨培养基米粉(或玉米粉)50克，蛋白胨10克，琼脂10克或20克，水1000毫升。 ③猴头培养基 马玲薯(去皮)200克，麦芽糖40克，磷酸二氢钾2克，硫酸镁0.5克，琼脂10克或20克，水1000毫升。用柠檬酸或食醋调至pH值5.5。 ④蜜环菌培养基。 青冈木木屑100克，马铃薯(去皮)200克，葡萄糖20克，磷酸二氢2克，硫酸镁0.5克，琼脂10克或20克，水1000毫升。 ⑤茯苓培养基。 葡萄糖30克，蛋白胨15克，磷酸二氢钾2克，硫酸镁0.5克，琼脂10克或20克，水1000毫升。 ⑥柱状田头菇培养基。 麦芽汁20毫升，酵母粉2克，蛋白胨1克，琼指10克或20克，水1000毫升。 ⑦鲍鱼菇培养基。 马铃薯(去皮)200克，葡萄糖20克，蛋白胨2克，玉米粉20克，琼脂10克或20克，水1000毫升。 ⑧阿魏侧耳培养基。 马铃薯(去皮)300克，葡萄糖20克，酵母粉2克，蛋白胨1克，琼脂10克或20克，水1000毫升。 ⑨大球盖菇培养基 马铃薯(去皮)200克，麦麸50克，蔗糖20克，阔叶木屑70克，蛋白胨2克，硫酸镁0.15克，磷酸二氢钾0.3克，琼脂10或20克，水1000毫升。 ⑩姬松茸培养基 马铃薯(去皮)200克，葡萄糖10克，蔗糖20克，硫酸铵3克，琼脂10克或20克，水1000毫升。 (1)材料的选择 制备母种培养基的材料中，有的化学成分相对稳定，如磷酸二氢钾、硫酸镁，有的则不十分纯正，如各种植物或动物的提取液或制品。凡可在化学试剂商店购买的化学试剂化学纯的纯度即可。使用天然植物性材料，如木屑、玉米粉、米粉、麦麸时，要认真挑选，不能使用生虫、发霉或不洁的材料。发芽的土豆不能使用。生物制剂如蛋白胨、酵母粉不可出厂时间过长，否则易变质，也影响灭菌效果和菌种的正常生长。调节培养基的酸碱度常用柠檬酸、食醋、氢氧化钠、碳酸钠和碳酸氢钠溶液。 (2)准确称量 培养基各成分的浓度都是固定的，不可随意改动。因此，各成分需准确称量。 (3)配制程序 植物性材料的麦麸、木屑、马铃薯，均需先煮，取其上清液，然后加入琼脂，使其融化，最后加入各种化学试剂，如葡萄糖，磷酸二氢钾等。生物制剂，如蛋白胨、酵母粉要事先用