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霉菌毒素的控制-检测方法以及解决方案——周勃博士
改性甘露聚糖-黄曲霉毒素 黄曲霉毒素 甘露聚糖 其他毒素与它的吸附方式 T2 呕吐毒素 赭曲霉毒素 烟曲霉毒素 乳酸菌对于霉菌毒素的作用 乳酸菌对于霉菌毒素的去除的作用是目前在食品和人类营养方面一个崭新的课题。目前主要集中在黄曲霉毒素AFb1上。已经有大量研究证实了一些乳酸菌能够很好去除黄曲霉毒素,可能还有其他毒素(参见随附的参考文献)。 霉菌毒素检测方法 饲料中霉菌及霉菌毒素的检测方法主要有目测法、 薄层色谱法 T LC 、 高效液相色谱法 HP LC 、 酶联免疫法 E LISA 、 放射免疫法 KIA 及气相色谱法等。 快速试纸检测法 薄层层析法 TLC T LC法是我国测定食品及饲料中霉菌毒素的国家标准方法之一 ,其原理是针对不同的样品 ,用适宜的提取溶剂将霉菌毒素从样品中提取出来 ,经柱层析净化 ,再在薄层板上层析展开、 分离 ,利用霉菌毒素的荧光性 ,根据荧光斑点的强弱与标准比较测定其最低含量。 T LC法由于设备简单 ,易于普及 ,所以国内外仍在使用 ,但该法样品前处理繁琐 ,且提取和净化效果不够理想 ,提取液中杂质较多 ,在展开时影响斑点的荧光强度 ,而双向展开虽避免了杂质干扰,但增加了操作步骤和时间 叶雪珠 ,2003 。 液相色谱法 HPLC HPLC法是近几年发展起来的检测霉菌毒素的方法,主要是用荧光检测器检测 。在适宜的流动相条件下,采用反相C18柱 ,使霉菌毒素同时分离。用 HPLC 法检测,最低检出量0. 08 ng ,回收率为 92. 87 % 。该法快速而准确 ,但需要昂贵的仪器设备 。 酶联免疫法 ELISA ELISA 法是1971年提出的。基本原理是在合适的载体上 ,酶标记抗体或抗原与相应的抗原或抗体形成酶标记的抗原抗体复合物 ,在酶底物参与下 ,复合物上的酶催化底物使其水解 ,氧化或还原成为另一种带色物质。可用分光光度计进行测定 ,从而可计算出参与反应的抗原和抗体的含量 杨利国 ,1998 。该免疫学方法更实际 ,其灵敏度与 TLC 或 HPLC 法相当或更高 ,因而具有更广阔的应用前景。 该法由于快速、 灵敏、 准确、 可定量、 操作简便、 无需贵重仪器设备 ,且对样品纯度要求不高等特性 ,特别适用于大批量样品的检测。 金标快速试纸条检测原理 试剂含有被事先固定于膜上测试区(T)的AFB1-BSA偶联物和被胶体金标记的抗AFB1特异性抗体。 测试时,样品滴入试剂盒孔内,如AFB1在样品中浓度低于5ng/ml时,胶体金抗体不能与AFB1全部结合。这样,胶体金抗体在层析过程中会被固定在膜上的AFB1-BSA偶联物结合,在测试区(T)内会出现一条紫红色条带。如果AFB1在样品中浓度高于5ng/ml时,胶体金抗体与AFB1全部结合,从而在测试区(T)内因为竞争反应不会与AFB1-BSA偶联物结合而不出现紫红色条带。 检测时间短,从样品处理到检测不到半小时。 采用无毒无害的乙酸乙酯为霉毒素提取剂,提取时短、溶剂易于去除,改变了传统脱溶剂长且污染环境和危害操作人员的健康等缺点。 不需紫外光源、专用检测仪和专业人员,适用于现场和基层单位。 操作简单、结果准确,可逐份检测,故成本低。 试剂稳定,室温保存,有效期长(至少一年半)。 金标试纸法快速检测的优势 理想的霉菌毒素吸附剂 具有吸附不同种类霉菌毒素的能力; 在饲料中使用量低且有效; 能在饲料中迅速均匀地混合; 在制备颗粒、膨化料和饲料储存期间具有较强的稳定性; 不会吸附饲料中的维生素、微量元素或其他营养物质; 在广泛的PH 范围内具有高稳定性; 排出后可被生物降解; Declan O , Sullivan 2003 谢谢大家 联系方式: 电邮:intech-zb@126.com 电话:座机电话号码 手机:1座机电话号码91 * 霉菌毒素的控制/检测方法以及解决方案 控制饲料原料中霉菌毒素的办法 农作物的耕种: 种植对霉菌有抵抗力的品种 使用有效的昆虫控制方法 维持好的灌溉系统 实行良好的耕作, 农作物轮换, 杂草控制 收割时: 适当的收割时间 迅速降低水份 除去多余的雑质 收获后及储藏: 保护储藏的原料/产品不被水份, 昆虫, 及其它环境因素的侵害 保存原料/产品在干燥干净的表面 测试所有要使用的原料的霉菌毒素 贮存桶及管路的定期清理 先进先出 收获后, 加工, 制造: 测试所有要使用的原料及成品的霉菌毒素 监控加工过程以维持高品质的产品 贮存桶及加工设备的定期清理 依照GMP程序 控制饲料原料中霉菌毒素的办法 饲喂动物: 保存产品在干燥干净的表面 先进先出 贮存桶及饲喂系统的定期清理 水槽的定期清理 垫料 控制饲料原料中霉菌毒素的办法 如何解决霉菌毒素的危害? 霉菌毒素的预防1 控制
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