麝香百合热激转录因子基因LlHsfA1的克隆与表达分析.doc

园 艺 学 报 2014，41（7）：1400–1408 http: // www. ahs. ac. cn Acta Horticulturae Sinica E-mail: yuanyixuebao@126.com 收稿日期：2014–01–06；修回日期：2014–05–08 基金项目：农业部公益性行业（农业）科研专项（200903020）；农业部‘948’引进项目（2011-G17） * 通信作者 Author for correspondence（E-mail：ymfang@） 麝香百合热激转录因子基因 LlHsfA1 的克隆与 表达分析 宫本贺1，易 瑾1,2，隋娟娟1,3，吴 健1，吴 泽1，程运河1，吴晨雨1， 刘 晨1，义鸣放1,* （1中国农业大学观赏园艺与园林系，北京 100193；2北京师范大学附属中学平谷第一分校，北京 101204；3阜阳师 范学院生命科学学院，安徽阜阳 236037） 摘 要：利用RACE的方法从麝香百合‘白天堂’叶片中克隆出热激转录因子（Heat shock transcription factor，Hsf）A1家族中一个成员的cDNA 全长序列。该基因编码序列长为1 587 bp，编码528个氨基酸， 蛋白质分子量为59.056 kD。序列和进化树分析表明，该基因具有A1类Hsf的5个关键功能域和调控基 序，与水稻的OsHsfA1a氨基酸序列同源性最高，说明该基因为HsfA1家族的新成员，将其命名为 LlHsfA1 。 利用荧光定量PCR的方法分析 LlHsfA1 表达模式，结果表明常温下其可在根、鳞茎和叶片中表达，说明 该基因为组成型表达；42 热激处理1 ~ 12 h，该基因的表达量在叶片中呈现“上升—下降”交替变化的 趋势。亚细胞定位表明，LlHsfA1定位在细胞核和细胞质中。 关键词：麝香百合；热激转录因子；基因表达；亚细胞定位 中图分类号：S 682.2 文献标志码：A 文章编号：0513-353X（2014）07-1400-09 Cloning and Expression Analysis of LlHsfA1 from Lilium longiforum GONG Ben-he1，YI Jin1,2，SUI Juan-juan1,3，WU Jian1，WU Ze1，CHENG Yun-he1，WU Chen-yu1， LIU Chen1，and YI Ming-fang1,* （1 Department of Ornamental Horticulture and Landscape Architecture ， China Agricultural University ， Beijing 100193， China ；2 The High School Affiliated to Beijing Normal University ， Pinggu First Branch ， Beijing 101204， China ；3 College of Biology ， Fuyang Normal College ， Fuyang ， Anhui 236037， China ） Abstract：A novel member of class A1 heat shock transcription factors（Hsfs）in full length with 1 587 bp coding sequence encoding a protein of 528 amino acid residues with a molecular weight of 59.056 kD was isolated from the leaves of Lilium longiforum ‘White Heaven’via RACE method. Deduced amino acid sequence analysis and phylogenic tree showed the gene named LlHsfA1 that had five critical domains and motifs，belonging to HsfA1 family and most closed to OsHsfA1a，was obviously different from each Hs