柑桔皮中提取鱼肉制品保鲜剂(N-亚硝胺生成阻断活性成分)的研究可研报告.doc

项目的立项依据 我国是柑橘的原产地和生产大国23.7％）和美国（15.9％），居世界第三位10.8%），居我国水果产量的第二位。 据资料介绍，柑橘果实产量中约有60％为加工所用，而加工后的残渣又占了果实的近50％，即我国一年的柑橘加工残渣可达450万吨。目前，我国柑橘加工后的残渣除少部分用于提取香精油和果胶外，大部分被丢弃，既造成了资源浪费，又污染了环境。发达国家在柑橘加工过程中，除从制罐、制汁后的残渣中提取柑橘精油和果胶外，还从中提取各种功能性活性物质，如a－1－8－萜二烯、黄酮等，最后再加工成动物饲料[1]，大大提高了柑橘的综合利用率，使柑桔加工副产品的地位不断上升。我国柑橘综合利用程度低的问题，已在一定程度上影响了柑橘产业的可持续发展。全国各地的柑橘产地及加工企业一直在为柑橘的深加工和综合利用寻找新途径，以提高柑橘的附加值。国内外以往对柑橘果皮的利用研究较多的集中在精油的榨取和香气成分组成、抗氧化活性等方面，对更深层次的研究不多。二十世纪90年代后期，国外开始有柑橘果皮中某些活性物质与N-亚硝胺生成阻断关系的研究报道，使柑橘果皮的研究由此更深入了一步，并为柑橘的综合利用提出了新的研究领域和课题。 N－亚硝胺是由亚硝酸盐与胺类反应生成的一类化合物，其生成前体物在食物中广泛存在在癌症的防治工作中，人们已将阻断体内亚硝基化合物的合成作为一项重要的防治措施。亚硝基化合物一般多在5μg·kg-1以下，个别香肠类制品可高达4520μg·kg-1。食品安全和质量是食品生产最基本的要求，是关系到人类健康的首要问题食物化学性污染:241. （7）许钢、张虹、庞洁：竹叶提取物对亚硝化反应的抑制.无锡轻工大学学报.2000.Vo.19,No.6:583-586. （8）Mirvish, S.S., Blocking the formation of N-nitroso compounds with ascorbic acid in vitro and in vivo. Ann NY Acad Sci. 1978, 258:175 （9）Mergens, W.J. The influence of ascorbic acid and DL-α-tocopherol on the formation of nitrosamines in vitro gastrointestinal model system. IARC Sci. Publ. Lyon. France 1981. 31: 259 （10）泽村正义：日本ユズ精油の特性と活性作用.AROMA RESEARCH. 2000.Vol.1 No.1:14-19。 （11）阿知和弓子、贺田恒夫、小宫孝志等：青果物ジュ-スのニトロソジメチルアミン生成抑制.日本食品科学工学会志.1997.Vol.44.No.1:50-54. 2、项目的研究内容、研究目标,以及拟解决的关键问题。: （1）以CO2超临界萃取法分别提取不同品种柑橘内、外果皮的有效成分，比较不同品种之间活性作用的差异； （2）用不同压力、温度以及不同夹带剂进行提取，比较提取条件对活性作用及成分的影响，确定CO2超临界萃取的最佳提取条件； （3）测定提取成分的NDMA体外生成阻断能力和抗变异能力； （4）对提取物进行组分分离，制备保鲜剂样品。 研究目标: 以广东产柑橘为主要研究对象，通过测定不同品种提取物的N－亚硝基二甲胺（NDMA）的体外生成阻断能力和抗变异能力，确定对NDMA生成具有阻断作用的功能化合物的化学结构和名称，同时通过比较不同的提取条件所得提取物的活性差异，确定最佳提取条件，为提升柑橘柚加工副产品的综合利用程度提供理论依据和应用基础。 拟解决的关键问题： 本研究项目拟解决如下关键问题： 1、究明柑橘果皮中具有NDMA体外生成阻断能力和抗变异能力活性成分的化学成分及结构，为下一步的机理研究打基础； 2、确定其活性成分的最佳提取条件，为今后用于医药或食品业提供可靠的理论依据和工艺技术参数。 3、拟采取的研究方案及可行性分析 研究方法： CO2超临界萃取法提取外果皮和内果皮的有效成分 分别将内外果皮冷冻干燥，用CO2超临界萃取法萃取外果皮和内果皮，比较不同的温度、压力及夹带剂对提取组分的影响，确定最佳提取条件。 NDMA体外合成阻断率测定 将不同提取条件下的提取物加入亚硝酸钠－二甲胺反应体系，使之在一定条件下反应后，用HPLC测定NDMA的生成量，根据生成量计算提取物的NDMA体外合成阻断率。 测定步骤及HPLC条件参照泽村正义法[1]。 抗变异能检测 按Amse 法[2]检测不同提取物的抗变异能力。即在试管中分别加入一定量的提取液、沙门氏菌液、S－9Mix磷酸钠缓冲溶液，在37℃振荡培养20min后，移