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药用石斛多糖的含有量测评探究论文 【摘要】目的测定不同种石斛及金钗石斛、马鞭石斛、叠鞘石斛、鼓槌石斛的不同药用部位中多糖的含量。方法采用紫外-可见分光光度法。结果不同种石斛茎中多糖含量为：球花石斛18.96%，马鞭石斛24.89%，金钗石斛20.49%，报春石斛15.83%，肿节石斛8.27%，叠鞘石斛16.32%，鼓槌石斛15.33%，美花石斛28.28%，兜唇石斛9.26%；4种石斛不同药用部位多糖的含量：金钗石斛根15.36%，茎20.49%，叶22.30%；马鞭石斛根17.56%，茎24.89%，叶20.88%；叠鞘石斛根9.48%，茎16.32%，叶17.42%；鼓槌石斛根10.06%，茎15.33%，叶19.81%。结论该实验方法简便、快速、准确。各种石斛及其根茎叶中多糖含量均比较高，从资源的综合和可持续利用的角度考虑，建议可以全草入药；美花石斛、球花石斛、报春石斛、叠鞘石斛、鼓槌石斛、肿节石斛茎在进行药效研究的提前下，确认是否可以替代当前《中国药典》品种入药。 【关键词】石斛多糖紫外-可见分光光度法 石斛属Dendrobium为兰科最大的属之一，全世界共有一千五百多种，广泛分布于亚洲、欧洲及大洋洲等热带及亚热带地区。我国约有76种，主要分布于西南、华东及华南地区。石斛首先记载于《神农本草经》，并列为上品。《本草纲目》言：“俗方最以补虚，主治伤中，除痹下气，补五脏虚劳羸瘦，强阴益精；厚肠胃，补内绝不足，逐皮肤邪热痒气，治男子腰脚软弱，健阳，补肾益力，壮筋骨，暖水脏，轻身延年等”在我国传统医学中经历了2000年以上的应用历史。《中国药典》2005年版收载金钗石斛DendrobiumnobileLindl、铁皮石斛DendrobiumcandidumWall.ex.Lindl、马鞭石斛DendrobiumfimbriatumHook。石斛具有滋阴清热、益胃生津和润肺止咳等功效，常用于治疗热病伤津、口干烦渴、病后虚热等多种病症。现代药理研究证明石斛中多糖类成分是石斛具有免疫增强作用和抗肿瘤作用的活性成分。 石斛为我国常用贵重药材，野生资源匮乏，而种植石斛规模较小，不能满足临床和新药开发的需要；而且民间药用石斛品种较复杂且规格不统一，它们能否替代药典品种入药，是迫切需要解决的问题。因此，本文对9种石斛茎中多糖、4种石斛的不同部位中多糖含量进行了测定，以期能寻找到石斛新的药用资源和新的药用部位，为科学、合理和正确使用该类药材提供实验数据。 一、材料与仪器 1.1仪器UV一752分光光度计(上海第三分析仪器厂)；SHB-3循环多用真空泵（郑州杜甫仪器厂）；hh-2数显恒温水浴锅（国华电器有限公司）；hctp11b5托盘天平（北京医用天平厂）；正德牌远红外可控调温电炉（成都市聚焱电器厂）；DHG-9240A型电热恒温鼓风干燥箱（上海精宏实验设备有限公司；KQ-250B型超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）。 1.2药材石斛药材收集于云南各地、四川夹江县歇马乡及成都五块石药材市场，所有药材均经刘圆教授鉴定。 二、方法与结果 2.1多糖的提取与精制称取各石斛药材粉末（过2号筛）100g，精密称定，分别至圆底烧瓶中，各加入石油醚（60～90℃)400ml，脱脂30min，过滤，通风橱中挥去溶剂。滤渣以80％乙醇100ml回流提取30min，趁热过滤。滤渣用80％热乙醇充分洗涤，再于通风橱中挥去溶剂。取各残渣分别再用500ml蒸馏水回流2h，提取3次，趁热过滤，用热水洗涤药渣和烧瓶，合并滤液。滤液浓缩至150ml，加入等容积的sevag试剂(按正丁醇∶氯仿=4∶1配制而成)，分液漏斗萃取。取上层液体，反复操作。紫外分光光度计扫描，无蛋白吸收峰。逐滴加入乙醇(95％)至整个溶液中含醇量达到80％，滴加过程中用磁力搅拌器搅拌，静置过夜。抽滤，沉淀用无水乙醇反复洗涤，60℃真空干燥，得各石斛精制多糖，封装备用。 2.2对照品溶液的制备称取葡萄糖约0.08g于小烧杯中，精密称定，用蒸馏水溶解后，移至100ml棕色容量瓶中，用蒸馏水定容，摇匀，得对照品溶液。 2.3标准曲线的制备精密取葡萄糖标准液1，1.5，2，2.5，3，3.5ml，分别置50ml棕色容量瓶中，各加蒸馏水至刻度。精密量取上述各浓度的标准溶液0.5ml于10ml棕色容量瓶中，各精密加入5%苯酚溶液1.0ml，摇匀，迅速加入5.0ml浓硫酸，在沸水浴中加热20min，冷却至室温。在波长490nm下测定吸光度，同时做一空白，以标准溶液浓度为横坐标，吸光度值为纵坐标绘制标准曲线。对所测数据采用回归法计算出标准曲线的回归方程为Y=4.9949X－0.0252（r=0.9994），结果表明在0.01