产表面活性剂耐微生物对石油降解作用效果及影响因素研究.pdf

产表面活性剂耐盐微生物对石油降解作用效果 及影响因素研究 摘要 辽河口湿地是我国重要的石油工业基地，石油开采过程和加工过程中会有部 分进入到周围环境，对海洋环境和土壤造成严重的污染，这对当地的生态环境、 居民健康状况及经济发展都造成严重危害。微生物修复技术因其经济有效且操作 简单已成为重要的治理石油污染技术。但石油烃类的疏水性限制了其生物可利用 性。添加生物表面活性剂可以增强石油烃污染物的生物可利用性，而促进微生物 对污染物的降解。且生物表面活性剂具有无毒安全、性能稳定、可生物降解等的 优点，使其在石油污染生物治理中的应用越来越受到重视。 本文研究了如何利用生物表面活性剂及其产生菌提高石油的降解效率。经过 富集培养、平板分离、排油活性及测定表面张力和石油降解能力等多步骤多种方 法，从辽河口湿地中长期受石油污染的土壤中筛选出一株具有产表面活性剂能力 并可降解石油的菌株LH-10，并采用单次单因子法对其产表面活性剂的培养条件 进行了优化。经鉴定LH一10所产表面活性剂为糖脂类物质。I。H一10在液体培养基 中培养4天可将发酵上清液的表面张力由82．9mN／m降低到45．3mN／m，培养7 天对石油降解率为58．9％。对其培养条件优化后，在409／L的花生油为碳源，2．59／L mN／m，发酵液中 的硝酸钠为氮源的条件下培养4天，可将表面张力降低到36．5 表面活性剂粗提取量达到1306．8mg／L。 利用实验室摇瓶实验研究了菌株LH．10、鼠李糖脂及不同鼠李糖脂浓度对海 水中石油降解的影响，测定了细菌数量、石油的降解率及正构烷烃组分的变化。 LH一10在海水培养基中培养7天对石油降解率为30％，随添加鼠李糖脂浓度增大 石油降解率增高，加入200mg／L鼠李糖脂后提高到70％，加入500mg／L时达到 72％。200mg／L的鼠李糖脂使培养基中细菌数量增高了3个数量级，石油中正构 烷烃的去除率由75％增高到98％，而且大大增强了菌株对石油中难降解部分的 讲解能力。结果表明，菌株LH一10和鼠李糖脂都有较好的耐盐性能，适应性强， 能够应用到海洋环境中。 利用菌株LH．10和鼠李糖脂对辽河口湿地石油污染土壤进行的为期60天的 牛物修复室内模拟试验，定期测定实验土壤中的异养菌茵落数、石油降解茵数量、 脱氢酶活性、石油降解率及鼠李糖腊含量变化。结果表明，添加高含量的鼠李糖 脂可明显增强土著微生物对石油的降解率，且随加入量增高而增强，添加鼠李糖 脂含量为5000mg／kg时可将60天的石油降解率由不添加时的70％提高到到88％， 且缩短去污时间30天左右，其间，微生物量和脱氢酶活性也明显提高：投加菌 株LH．10并不能增强石油的降解率，但同时投加鼠李糖脂也可提高60天的石油 降解率为85％；添加到土壤中的鼠李糖脂很快被微生物降解，不会残留在土壤中 再次污染土壤。因此，向石油污染土壤中投加产表面活性剂菌株及其表面活性剂 是最好的治理办法，不仅增强了石油污染物的去除率，还可缩短去除时间，且不 会造成二次污染。 关键词：生物表面活性剂；石油污染；生物降解；石油降解菌 II Studiesonthe effectand factors oil-degradationinfluencing ofsurfactant salt producingmicroorganisms Abstract Liaohewetlandisan oil baseof isa importantindustry China．However，there numberofoilintothe environmenttheextractionand large surrounding during of