多氯联苯降解菌分离纯化与酶学性质研究.pdf

多氯联苯降解菌的分离纯化与酶学性质研究 摘 要 本文以废旧变压器周围的污染土壤为多氯联苯降解菌的接种源，分离纯化 出具有降解多氯联苯能力的菌株。为考察菌株对多氯联苯的降解效率，分别研 究温度、pH、接种量等因素对降解效果的影响，并深入分析了菌株活性酶的性 质及酶促反应条件。 实验以联苯为单一碳源进行分离、纯化，得到一株对多氯联苯有作用的菌 株。此菌株在生长过程中分解联苯形成黄色的有机物质；经革兰氏染色，为 Gram+，细胞呈杆状(0．4～O．6¨mX 株与Bacillussubtilis同源性高达99％，据此构建了系统发育树状图。 通过气相色谱法测定发现，菌株的最佳降解条件为：发酵温度35℃、pH 值7．0、装液量100 中150 r／min下振荡培养3天。运用正交实验分别测定不同温度、pH、装液量、 摇床转速条件下菌株的生长情况，研究发现，菌株的最佳生长条件与降解条件 基本一致，其中pH为最主要影响因素，温度和摇床转速为次要因素，装液量 为不重要因素。 研究发现，在菌株WFl(命名为WFl)中检测到联苯双加氧酶的活性，所 产降解酶为胞内酶，确定其最适反应温度为35℃，最适pH值7．5，且Na+能提 Fe” 、Cu2+均有不同程度的抑 高酶活，K+基本没有影响，M92+、Ca2+、 制作用。 关键词：多氯联苯；枯草杆菌WFl；分离；活性酶 Isolationand ofthe analysisenzyme ofa strain PCBs—-degrading ABSTRACT the soilnear Anew of strain from originatedpolluted speciesPCBs—degrading isolated．Inorderto the thewastetransformerwas degradation investigate andinoculumwere the efficiency．thetemperature、pH researched，alsoenzymology andthe reactionwerestudied． enzymatic and the was was afterenriched Thestrain biphenyl separated purified，when carbonsourcetocultivatethe resultsshowed usedasalone microorganism．The the to substances that