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第33 卷 分析化学 （FENXI HUAXUE ） 研究简报 第11 期 2005 年11 月 Chinese JOurnai Of Anaiyticai Chemistry 1593 ~ 1595 菲林B 近红外分光光度法测定维生素C 杨 婷 逯家辉 张大海 孟庆繁 蒋朝军 李 迪 王跃溪 滕利荣＊ （吉林大学生命科学学院，长春 130012 ） 摘 要 在pH 3 的三氯乙酸酸性介质中，菲林B 可以定量地将还原型维生素C 氧化成脱氢型维生素C，利用 脱氢型维生素C 在920 nm 处有最大吸光度，测定其含量，建立了一种测定维生素C 的新方法，并研究了影响 反应的各种因素。该方法对维生素C 的检出限为0 . 17 mg/ L ；线性范围为0 . 5 ~ 10 mg/ L ，对水果中维生素C 含量测定的RSD 2 . 31% ；回收率为99 . 7% ~ 101. 1% ，比2 ，4-二硝基苯肼分光光度法测定结果的相对偏差 1 1. 6% 。 关键词 菲林B，近红外分光光度法，维生素C 1 引 言 维生素C（抗坏血酸）广泛存在于各种食品、药物之中，特别是水果、蔬菜中含量丰富。是一种可以 为人体细胞提供抗氧化作用的还原剂。维生素C 主要作用是维持血管弹性，增强毛细血管抵抗力，降 低其脆性与通透性，并促进其细胞增生和防止血细胞凝集。测定各种食品及药物中维生素C 的含量， 对于食品、药物的开发和检验具有重要意义。 维生素 ［1］ ［2 ］ C 的测定方法主要有2 ，6-二氯靛酚滴定法 、2 ，4 -二硝基苯肼分光光度法 、荧光分光光 ［2 ］ ［3 ］ ［4 ］ ［5 ］ 度法 、碘量电位滴定法 、钼蓝比色法 及褪色光度法 等。2 ，6-二氯靛酚滴定法及2 ，4 -二硝基苯 肼分光光度法操作复杂，测试条件较为严格。2 ，4 -二硝基苯肼分光光度法完成一次样品分析需数小时， 不能快速测定［6 ］。本研究建立了一种测定水果中维生素C 的菲林B（FOiin B ）近红外分光光度法。该 方法方便、快速，操作简单，灵敏度高，测试条件允许范围较宽，抗干扰能力强，无须对样品进行特别处 理，可用于测定微量的维生素C 。经样品测定，结果令人满意。 2 实验部分 2 . 1 仪器与试剂 UV-3150 型紫外可见近红外分光光度计（日本岛津公司）；FSH- !型高速匀浆机（江苏金坛医疗仪 器厂）；恒温培养箱（上海跃进医疗器械厂）。维生素C 标准溶液（北京鼎国生物技术有限责任公司， Sigma 公司进口分装）（50 mg/ L ）：准确称取60 C 真空干燥2 h 的5 mg 维生素C ，加入适量pH 3 三氯乙 酸溶液溶解，定量转移到100 mL 的棕色容量瓶中，用pH 3 三氯乙酸溶液稀释至刻度，暗处保存；FOiin B［7 ］及实验所用其它试剂均为分析纯。 2 . 2 实验方法 取两支10 mL 具塞比色管，其中一支加入适量的维生素C ，另一支不加；然后分别依次加入2 mL 的 FOiin B 试剂，用pH 3 三氯乙酸溶液稀释至刻度，摇匀，反应5 min 后，以试剂空白为参比，使用1 cm 玻 璃吸收池在920 nm 波长处测定吸光度! 值。平行测量3 次，取平均值。 3 结果与讨论 3 . 1 最大吸收峰的选择 吸取2 mL 的维生素C 标准溶液，按实验方法反应后，以试剂空白为参比，在750 ~ 1100 nm 波长范 围内扫描吸收光谱，结果见图1。由图1 可知，在920 nm 处有最大吸收峰，因此，本实验选择920 nm 为 2004 -10-20 收稿；2005-0 1-18 接受 本文系吉林省科技发展基金（NO. 座机电话号码 ）资助 分析化学 第33 卷 1594 测量波长。 3 . 2 Folin B 试剂用量的影响 吸取0. 2 、0. 5 、1. 0、1. 5、2. 0 和2. 5 mL 的FOlin B 试剂，分 别加入维生素 C 标准溶液2 mL ，按实验方法测定吸光度A （图2 ）。由图2 可知，随着FOlin B 试剂用量的不断增加，吸光 度A 增大，在2 mL 时达到最大值；FOlin B 用量介于1. 5 ~ 2. 5 mL 时，吸光度A 较大且稳定。说明FOlin B 试剂用量过少时反 应不完全，当维生素C 的浓度小于50 mg / L ，FOlin B 试剂的用 图1 脱氢型维生素C 的吸收光谱 量为2 mL 。 Fig. 1 Scan spectrum Of vitamin C（VC ） 3 . 3 反应温度和反应时间的影响 吸取2