营养条件和流加发酵对放射型根瘤菌(Rhizobium radiobacter)产辅酶Q10的影响.pdfVIP

卷 期 生 物 工 程 学 报 ! # ’ ! *’ # 年 月 #$$% % !#$%% ’ *$+, - .# /%0$ , 12 +,-./ #$$% !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 营养条件和流加发酵对放射型根瘤菌 （ ）产辅酶 的影响 !#$%#’ *+#%*,-. !# ， ! # ! ! 吴祖芳 堵国成 陈 坚 ! （江南大学教育部工业生物技术重点实验室，无锡 #!C$%1 ） # （宁波大学生命科学与生物工程学院，宁波 %!5#!!） 摘 要 利用放射型根瘤菌 （ ）重点考察了葡萄糖、蔗糖、玉米浆和蛋白胨、添 DEF#1$! 3#4 5# 6 *+7# 5+0/%* DEF#1$! 加物以及流加发酵对细胞生长和产辅酶 的影响，结果表明，葡萄糖和蔗糖适合于生产辅酶 的最佳浓度分别 G!$ G!$ 为 和 ；辅酶 发酵时玉米浆和蛋白胨的最适浓度分别为 和 ；添加蕃茄汁、玉米浆能提高 %$ HI J C$ HI J G!$ !! HI J !1 HI J 发酵液的生物量，玉米浆、异戊醇、 甲硫氨基酸等能促进辅酶 的积累；与分批发酵相比，在 罐上流加蔗糖其 J0 G!$ KJ 细胞生物量（ ）和辅酶 积累量增加，若在流加蔗糖的同时流加适当浓度的玉米浆能显著提高辅酶 的产 LMD G!$ G!$ 量，最大产量达到 ；最大生物量（ ）和胞内辅酶 含量（ 值）分别达到 和 ， 5# C 9HI J LMD G!$ MI N #1 C HI J # %4 9HI H0LMD 比不流加的分批发酵分别提高5%O 和%%O ，比只流加蔗糖分别提高#C O 和#1 O 。 关键词 辅酶 ，放射型根瘤菌，营养条件，流加发酵 G!$ 中图分类号 文献标识码 文章编号 （ ） G%5 P !$$$0%$1! #$$% $#0$#!#0$5 辅酶 结构上属于醌式并带有异戊烯基侧链 物技术研究室保存。 G!$ 培养基：斜面和种子培养基：葡萄糖 ，蛋 的醌类化合物，在动植物、微生物细胞内与线粒体内 $ $% # O 白胨 ，酵母膏 ，氯化钠 ，斜面培养基另 膜相结合，是生物细胞能量代谢的重要物质之一，又 !O !O $ 5 O 加琼脂 ， ；发酵基本培养基：葡萄糖 ， 类似于脂溶性维生素的功能；关于辅酶G!$ 的许多重 # O QF K # # O ［，］ 蛋白胨 ，酵母膏 ， ， ! # !O !O RF ST $ $5 O *, FST 要功能已有较多文献报道 。作为药物的辅酶 # C # C ， · ， ， 灭 $ !5 O +HET KF T $ $5 O QF K $ !#!U !59: G!$ ，由微生物发酵法生产其性能优于化学合成法， C # 菌。 酵母菌、假单胞菌和土壤杆菌属等多种微生物可生 ［，］ % 主要仪器设备 产辅酶G!$ % C ；本试验利用研究室保藏的一株放射 高压液相色谱仪 （ ）（ PH: 3 @ !!$$ VEP W’-X,7 EN0 型根瘤菌DEF#1$! 作为生产菌株，在实验室摇瓶发 柱， ， ）。 全自动控制发 M!4 5 9 #5$ 99 Y C 1 99 KJ ! 酵条件研究的基础上，进一步在KJ 发酵罐上对辅酶 酵罐，配温度、 自动调节与溶氧显示系统，韩国 QF G!$ 发酵生产的营养条件、流加策略进行优化，提出 产； 回转式恒温调速摇瓶柜，上海产。 FZ[0 在分批发酵初期采用葡萄糖作碳源来提高细胞生长 ’ 方法 量，然后混合流加蔗糖和玉米浆提高辅酶G!$ 产率的 ’ 菌种活化及液体种子的制备：将试验菌用接 流加策略，同类研究国内外未见文献报道。 种环接入斜面培养基， 下静置培养 ，然后移 %$ U #C / 接至种子培养基（装液量 锥形瓶）， 材料与方法 5$9JI#5$9J %$ U 培养#C / 后得种子液，摇床转速#$$ -I9: 。 $ 材料 ’ % 摇瓶培养和流加发酵：按上述种子液以1 O 菌种：放射型根瘤菌 （ 接种量，接入不同发酵培养基（装液量摇瓶 $ $ DEF#1$! 3#4 5# 6 *+8 5$9JI 7# 5+0/%* DEF#1$!），江南大学生物工程学院环境生 ， 发酵罐装液量 ）， 培养（摇床转速 5$$9J KJ 5J %$ U 收稿日期： ，修回日期： 。 #$$#0$0#% #$$#0!#0!1 通讯作者。 ： ； ： ；