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葡萄糖中还原糖含量测定 目录 概述 葡萄糖的还原滴定 滴定过程影响因素 滴定过程注意事项 概述 碳水化合物分类 为什么说还原糖的测定是糖类的定量基础？ 碳水化合物 有效碳水化合物 可以被人吸收 ： 单糖 葡萄糖 、低聚糖 蔗糖 糊精、淀粉、糖原等 无效碳水化合物： 果胶、 半 纤维、木质素等 鲜果中含葡萄糖和果糖1-10% 无籽葡萄干高达70% 葡萄糖中还原糖含量的测定 仪器和试剂 仪器部分： Mettler-Toledo T50自动滴定仪，旭野红外加热板，电子天平 试剂部分： 硫酸铜（五水硫酸铜），亚甲基蓝，酒石酸钾钠，氢氧化钠，亚铁氰化钾，葡萄糖 溶液配制 碱性酒石酸铜甲液：称取15g硫酸铜及0.05g亚甲蓝，溶于水，并稀释到1000ml； 碱性酒石酸铜乙溶液：称取50g酒石酸钾钠，75g氢氧化钠，溶于水中，再加入4g亚铁氰化钾，完全溶解后，稀释至1000ml。 葡萄糖标准溶液：称取1g（精确值0.0001g）经过98℃-100℃干燥2h的葡萄糖，加水溶解后加入5ml盐酸，并以水稀释至1000ml，此溶液每毫升相当于1.0mg葡萄糖。 样品处理 取适量的样品，在70℃控干10分钟，然后称量0.25g溶于250ml。 实验操作： 标定碱性酒石酸铜溶液：用移液器准确吸取5.0ml碱性酒石酸铜甲溶液及5.0ml酒石酸铜乙溶液，置100ml烧瓶中，加入3-4颗沸石，加水10ml。软件控制（点击位于滴定仪控制面板上BD-C6,加入9ml葡萄糖标准溶液，用红外加热板调好功率，快速加热至沸腾并以2杪一滴的速度用葡萄糖标准溶液滴 定至终点（电位发生突变）得到滴定体积V0。 2.试样溶液预滴定（方法C6-1 用移液器吸取5.0ml碱性酒石酸铜甲溶液及5.0ml酒石酸铜乙溶液，置于100ml烧瓶中，加入3-4颗沸石，加水10ml。加5ml的试样溶液，用红外加热板调好功率，快速加热至沸腾并保持沸腾，以1杪一滴的速度用葡萄糖标准溶液滴定至终点（电位发生突变）得到预滴定体积。 试样溶液滴定（C6-2 用移液器吸取5.0ml碱性酒石酸铜甲溶液及5.0ml酒石酸铜乙溶液，置于100ml烧瓶中，加入3-4颗沸石，加水10ml。加5ml的试样溶液，软件控制比预 滴定体积少1ml的葡萄糖标准溶液，用红外线加热板调好功率，快速加热至沸腾，保持沸腾，并以2秒一滴的速度用葡萄糖标准溶液滴定至终点，得到滴定体积V1。 计算公式： X（葡萄糖含量） V0-V1 /5 葡萄糖中还原糖的测定 实验过程中应思考以下问题： 不做预备滴定与做预备滴定有什么不同？ 溶液一直保持沸腾滴定与加热后，离开热源滴定，滴定结果有什么不同？ 样品溶液预测的目的 一是本法对样品溶液中还原糖浓度有一定要求（0.1%左右），测定时样品溶液的消耗体积应与标定葡萄糖标准溶液时消耗的体积相近，通过预测可了解样品溶液浓度是否合适，浓度过大或过小应加以调整，使预测时消耗样液量在10ml左右； 二是通过预测可知道样液大概消耗量，以便在正式测定时，预先加入比实际用量少1ml左右的样液，只留下1mL左右样液在续滴定时加入，以保证在1分钟内完成续滴定工作，提高测定的准确度。 滴定必须在沸腾条件下进行 一是可以加快还原糖与的反应速度； 二是次甲基蓝变色反应是可逆的，还原型次甲基蓝遇空气中氧时又会被氧化为氧化型。此外，氧化亚铜也极不稳定，易被空气中氧所氧化。 保持反应液沸腾可防止空气进入，避免次甲基蓝和氧化亚铜被氧化而增加耗糖量。 思考题 如何标定裴林试剂的浓度？ 滴定是终点的颜色变化怎样？ F c ? V 式中：F