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蔬菜残留物检验方法 一、对蔬菜中农药残留检测 据必威体育精装版的研究表明农药污染较重的有叶类蔬菜，其中韭菜、油菜受到的污染比例最大。茄果类蔬菜如青椒、番茄等，嫩荚类蔬菜如豆角等，鳞茎类蔬菜如葱、蒜、洋葱等，农药的污染相对较小。 其主要通过以下几种途径对食物进行污染：农药直接污染农作物；因水质污染进而污染水产品；土壤中沉积的农药通过农作物的根系吸收到作物组织内部而造成污染；大气中漂浮的农药随风向、雨水对地面作物、水生生物产生影响；饲料中残留的农药转入禽畜体内，造成此类食品的污染。 目前所使用的农药按其化学结构大致可分为以下几类： 有机氯类；有机磷类；氨基甲酸酯类；拟除虫菊酯类等。 根据有机磷农药 （Ops）的化学特性和毒理学性质，检测有机磷农药 （Ops）的方法有二大类： 速测仪法 ；仪器分析法（气相-质谱联用法） （一）、速测仪法 速测仪的检测方法有两种: GB/T5009.199-2003 速测卡法（纸片法） 酶抑制率法（分光光度法） 1.速测卡法（纸片法） 检测原理 有机磷或氨基甲酸酯类农药对乙酰胆碱酯酶的活性具有抑制作用，通过测定乙酰胆碱酯酶的活性被抑制的程度，根据样品与乙酰胆碱酯酶作用后的显色反应，即可知样品中含有的农药残留情况。 1.1试剂 1.1.1 固化有胆碱酯酶和靛酚乙酸酯试剂的纸片 速测卡 。 1.1.2 pH7.5缓冲溶液：分别取15.0g磷酸氢二钠 Na2HP04·12H2O 与1.59g无水磷酸二氢钾[KH2P04]，用500mL蒸馏水溶解。 1.2仪器 1.2.1常量天平 有条件时配备37℃±2℃恒温装置 1.3分析步骤 1.3.1整体测定法 1.3.1.1选取有代表性的蔬菜样品，擦去表面泥土，剪成1cm左右见方碎片，取5g放入带盖瓶中，加入10mL缓冲溶液，震摇50次，静置2min以上。 1.3.1.2取一片速测卡，用白色药片沾取提取液，放置10min以上进行预反应，有条件时在37℃恒温装置中放置10min。预反应后的药片表面必须保持湿润。 1.3.1.3将速测卡对折，用手捏3min或用恒温装置恒温3min，使红色药片与白色药片叠合反应。 1.3.1.4每批测定应设一个缓冲液的空白对照卡。 1.3.2表面测定法（粗筛法） 1.3.2.1擦去蔬菜表面泥土，滴2～3滴缓冲溶液在蔬菜表面，用另一片蔬菜在滴液处轻轻摩擦。 1.3.2.2取一片速测卡，将蔬菜上的液滴滴在白色药片上。 1.3.2.3放置10min以上进行预反应，有条件时在37 ℃ 恒温装置中放置10min。预反应后的药片表面必须保持湿润。 1.3.2.4将速测卡对折，用手捏3min或用恒温装置恒温3min，使红色药片与白色药片叠合反应。 1.3.2.5每批测定应设一个缓冲液的空白对照卡。 2.酶抑制率法（分光光度法） 2.1试剂 2.1.1 pH8.0缓冲溶液：分别取11.9g无水磷酸氢二钾与3.2g磷酸二氢钾，用1000ml蒸馏水溶解。 2.1.2 显色剂：分别取160mg二硫代二硝基苯甲酸（DTNB）和15.6mg碳酸氢钠，用20ml缓冲溶液溶解，4℃冰箱中保存。 2.1.3 底物：取25.0mg硫代乙酰胆碱，加3.0ml蒸馏水溶解，摇匀后置4 ℃冰箱中保存备用。保存期不超过两周。 2.1.4 乙酰胆碱酯酶：根据酶的活性情况，用缓冲溶液溶解，3min的吸光度变化△Ao值应控制在0.3以上。摇匀后置4℃冰箱中保存备用，保存期不超过四天。 2.1.5 可选用由以上试剂制备的试剂盒。乙酰胆碱酯酶的△Ao值应控制在0.3以上。 2.2仪器 2.2.1 分光光度计或相应测定仪及常量天平。 2.3分析步骤 2.3.1 样品处理：选取有代表性的蔬菜样品，冲洗掉表面泥土，剪成1cm左右见方碎片，取样品1g，放入烧杯或提取瓶中，加入5mL缓冲溶液，振荡1～2min，倒出提取液，静置3～5min，待用。 2.3.2 对照溶液测试：先于试管中加入2.5mL缓冲溶液，再加入0.1mL酶液、0.1mL显色剂，摇匀后于37℃放置15min以上 每批样品的控制时间应一致 。加入0.1mL底物摇匀，此时检液开始显色反应，应立即放入仪器比色池中，记录反应3min的吸光度变化值△Ao。 2.3.3 样品溶液测试：先于试管中加入2.5mL样品提取液，其它操作与对照溶液测试相同，记录反应3min的吸光度变化值△At。 （二）、仪器分析法（气相-质谱联用法） 蔬菜农药残留检测步骤 农药残留检测步骤主要包括采样、样品保藏、前处理（粉碎、提取/萃取、净化、浓缩等）、仪器定性定量分析、检测结果处理及分析等。 3.1 样品均质 在检测蔬菜的某些指标时，由于物料不是均质的，各部位的成分及污染的程度不同，必须把样品破碎混匀成均质液，才能进行检测。如何将蔬菜均质？我们可