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虫草液体菌种制作及质量检验方法（上） 2010年4月13日 ???来源：《食用菌市场》2009年第六期 字号[ 大 中 小 ] 虫草液体菌种制作及质量检验方法（上） 井大鹏? 王明辉/文 　　摘要：液体菌种是指菌丝体的纯培养完全在液体培养基中进行培养而成的菌种。应用液体菌种进行虫草生产能显著提高产量和质量，便于工厂化和标准化生产。本文综述了虫草液体菌种的优势，制作及质量检验方法。 　　关键词：虫草 液体菌种 培养液 检验方法 　　随着国内外市场对虫草产品需求的增加，虫草生产方式由小户型、季节性生产的模式逐渐向工厂化、标准化、周年化、规模化生产发展。伴随新技术、新工艺、新设备的研发问世，采用深层培养工艺制备虫草液体菌种已应用于生产中。由于液体菌种具有成本低、生产周期短、菌龄一致、接种简便快捷、便于管理等优点，因而深受虫草栽培者的欢迎。 　　一、虫草液体菌种的生产方式 　　一般可分为电磁搅拌法、摇瓶机法、简易深层发酵（吹氧）法、发酵罐法。 　　1、电磁搅拌法。设备技术比较简单，投资较少，但生产量小，生产的液体菌种是菌丝团。 　　2、摇瓶机法。摇瓶机培养投资少，设备技术简单，管理方便，适合一般菌种厂生产使用，生产出来的液体菌种是菌球。 　　3、简易深层发酵（吹氧）法 。 制作工序繁琐、配套设备要求较高、各部件必须在无菌条件下进行组装，生产的液体菌种是菌球。 　　4、发酵罐法 。 需要一整套的发酵设备，投资大，技术要求严格，只适用于工厂化的大规模生产，生产出来的液体菌种是菌球。 　　二、虫草液体菌种的培养方法 　　通常采用摇瓶机法和简易深层发酵（吹氧）法来生产培养液体菌种。若小规模生产，一般可采用摇瓶机法培养液体菌种。本文主要介绍摇瓶机振荡培养技术。 　　1、 液体培养基配方 　　（1）土豆20%（煮汁）、葡萄糖2%、酵母膏0.5%、磷酸二氢钾0.05%、硫酸镁 0.05%、维生素B1 2片、水1000ml、pH值自然。 　　（2）土豆30%（煮汁）、蚕蛹粉2%、蔗糖１%、磷酸二氢钾0.1%、硫酸镁0.05%、维生素B1 2片、水1000ml、pH值自然。 　　（3）土豆20%、葡萄糖2%、玉米粉2%、黄豆粉1%、酵母膏0.2%、磷酸二氢钾0.15%、硫酸镁0.05%、水1000ml、pH值自然。 　　（4）葡萄糖1%、蛋白胨1%、酵母膏0.l%、磷酸二氢钾 0.1%、硫酸镁 0.05%、生长素5ml、水1000ml、pH值自然。 　　（5）葡萄糖2%、蛋白胨0.2 %、磷酸二氢钾0.046 %、硫酸镁0.05 %、磷酸氢二钾0.1 %、水1000ml、pH值自然。 　　（6）葡萄糖2%、蛋白胨0.4%、牛肉膏0.4%、磷酸二氢钾0.1%、硫酸镁0.05 %、维生素B1 2片、水1000ml、pH值自然。 　　（7）葡萄糖3%?、豆 粉2%、玉米粉1%、硫酸镁？0.05%、磷酸二氢钾0.1%、酵母粉0.5%、水1000ml、pH值自然。 　　（8）葡萄糖2%、蛋白胨1%、酵母粉0.5%、玉米粉2%、磷酸二氢钾0.1%、硫酸镁0.05%、水1000ml、pH值自然。 　　（9）葡萄糖2%、黄豆粉1%、磷酸二氢钾0.3%、硫酸镁0.04%、氯化钠（食盐）0.03%、味精0.01%、维生素微量、水1000ml、 pH值自然。 　　（10）蔗糖3%、天门冬酰胺0.1 %、磷酸二氢钾0.125 %、硫酸镁0.03 %、氯化钠（食盐）0.05 %、水1000ml、pH值自然。 　　2、液体培养基的制作 　　（1）按配比精确称取各种营养物质。 　　（2）配制溶液。为避免发生沉淀，可将各种营养成分单独溶解分别制成母液，加入的顺序一般是先加缓冲化合物，溶解后加入主要元素，然后是微量元素，再加入维生素等。最好是每种成分完全溶解后，再加入第二种营养成分。若各种成分均不发生沉淀，也可以一起加入。 　　若用马铃薯、玉米粉、黄豆粉等原料时，应先制取这些原料煮汁，然后再把煮汁与其它成分混合。 　　例如：配方一液体培养基的配制。?? 土豆20%（煮汁）、葡萄糖2%、酵母膏0.5%、磷酸二氢钾0.05%、硫酸镁 0.05%、维生素B1 2片、水1000ml、pH值自然。 　　（3）将新鲜土豆洗净去皮、挖掉芽眼的土豆切成小块放入小锅或大烧杯中，加入一定量的水，用文火煮沸30分钟左右，至土豆软而不烂时，用6～8层布过滤，取滤汁于锅中。 　　（4）补水。 加水至1000～1200 ml。 　　（5）按配方顺序加入需加的其他营养物质，文火煮5～10分钟。 　　（6）充分搅拌均匀，并调PH。 　　一般用10％HCl或10％NaOH调pH，用pH试纸（或pH检测仪）进行测试。 　　（7）沉淀分装。 培养液配制好后，沉淀1小时取上清液，分装入500mL容量的三角烧瓶中，每瓶装量为1