赖氨酸脱羧酶发酵工艺及酶学性质.pdfVIP

第 23卷第 11期 精 细 化 工 Vol. 23 ,No. 11 2 0 0 6年 1 1月 F INE CHEM ICAL S Nov. 2 0 0 6 生物工程 赖氨酸脱羧酶发酵工艺及酶学性质 蒋丽丽 ,吴晓燕 ,刘 　毅 ,刘 　茜 , 焦庆才 南京大学 生命科学学院 医药生物技术国家重点实验室 ,江苏 南京 　2 10093 摘要 :考察了蜂房哈夫尼菌 H. a lvei A S1. 1009 的 L 赖氨酸脱羧酶对 L 赖氨酸的脱羧作用 ,分析了培养基 、温 ρ ρ 度 、pH、激活剂等因素对酶活力的影响 。实验结果表明 ,最适培养基成分为 : 蔗糖 20 g/L、 玉米浆 20 ρ ρ ρ ρ ρ ρ g/L、 酵母膏 5 g/L、 牛肉膏 3 g/L、 蛋白胨 10 g/L、 氯化钠 5 g/L、 硫酸铵 2 g/L、 维生 素 B6 5 g/L 和 ρ L 赖氨酸 5 g/L , 100 mL 发酵液中接种量为 5 mL 液体菌种 。最佳转化工艺条件为 :转化 体系温度 35 ℃、pH 50 , ρ 菌体 10 g/L , ρ 吐温 80 015 g/L 。L 赖氨酸脱羧酶在最适发酵和转化条件下 比酶活可达 7 984. 43 U ,底物转化率可达 70% 。 关键词 :蜂房哈夫尼菌 A S 1. 1009; L 赖氨酸脱羧酶 ; L 赖氨酸 ;尸胺 ;发酵工艺 中图分类号 : TQ426. 97　　文献标识码 : A 　　文章编号 : 1003 - 52 14 2006 11 - 1060 - 05 Ferm en ta tion and Properties of L y sine D ecarboxy la se J IAN G L ili,WU X iaoyan , L IU Yi, L IU Q ian , J IAO Q ingcai The S ta te Key L abora tory of P ha rm aceu tic B iotechnology, S chool of L if e S cience, N anj ing Un ivers ity, N anj ing 2 10093, J iangsu, Ch ina A b stract:L Lysine can be converted to cadaverine w ith lysine decarboxyla se wh ich is found in H af n ia a lvei A S 11009. Factors affecting the enzym atic activity were studied. The op tim um ferm en tation m edium con sists of ρ saccharo se 20 g/L , ρ corn steep liquor 20 g/L , ρ yea st extract 5 g /L , ρ ρ ρ ρ ρ beef extract 3 g/L , p ep tone 10 g/L , N aC l 5 g/L , 〔NH4 2 SO4 〕 2 g/L , vitam in B6 5 g/L and ρ L lysine 5 g/L. 5 mL liqu id bacteria wa s inocu lated in 100 mL zymotic flu id. The op tim al ferm en tation condition s are temp eratu re 35 ℃, in itial pH of the buffer 50 , ρ bacterium 10 g/L and ρ Tween - 80 015 g/L. Enzym atic activity can rise to 7 984. 43 U and conversion of the sub strate reache s 70%. Key words:H af n ia a lvei A S1. 1009; L lysine decarboxyla se; L lysine; cadaverine; ferm en tation Founda tion item : Supported by the techno logy innovation foundation of Ch ina 02CJ -