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高三生物选修一淀粉酶的固定化
优点 (1)提高酶稳定性; (2)可反复或连续使用;成本降低 (3)易于和反应产物分开; 产物溶液无酶残留,简化提纯工艺;提高产物质量 (4)酶反应过程可严格控制; * α—淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测 固定化酶 分离纯化后固定在非水溶性载体上、可投放到反应溶液中使用又能被收回的酶。 水溶性酶 非水溶性载体 非水溶性酶 (固定化酶) 固定化技术 多糖、蛋白质、玻璃、陶瓷、聚酯、聚胺、尼龙、树脂、淀粉、明胶、胶原、 吸附法 包埋法 共价交联法 共价偶联法 载体结合法 缺点 固定化时酶活性有损失 淀粉 糊精 α—淀粉酶 α—淀粉酶 来源 固定 产物检测 最适pH 最适温度 枯草杆菌 石英砂 碘——碘化钾 5.5~7.5 50℃~75℃ 实验步骤 ①用50ml小烧杯称取5g石英砂,加入4ml α–淀粉酶溶液,缓慢搅拌30分钟,使α–淀粉酶固定到石英砂上,放入注射器中。 实验6α-淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测 怎样使石英砂不从注射器中漏出? 夹子、滤纸片 ②用10倍蒸馏水清洗注射器 最后一次清洗时取其上清液2滴加到点样板上,同时滴加1%淀粉溶液混匀,再加入KI-I2溶液,若溶液变为蓝色,说明未固定到石英砂上的α–淀粉酶已完全除去; 怎样保证注射器中不含游离的酶?怎样确定? ③将灌注了固定化酶的注射器放在注射器架上,用滴管加淀粉溶液,使淀粉溶液约以0.3ml/min的流速过柱。 *
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