利用微卫星标记分析31个中国地方绵羊品种的遗传多样性.pdfVIP

146 2006学术年会 利用微卫星标记分析31个中国地方绵羊品种的遗传多样性。 马月辉“赵倩君杨燕闫景娟陈红艳苑存忠季香 狄冉央金郭军李宏滨关伟军 (中国农业科学院北京畜牧兽医研究所北京100094) 摘要：利用29个微卫星标记对中国31个绵羊品种进行了遗侍多样性分析，计算了品种的期望杂合度、观察杂台度、 观察等位基因数、有效等位基因数和遗传距离。浪卡子绵羊的平均杂合度最低为0．5276，太尾末羊的观察杂舍度最高为 0，6917。大尾寒羊与鸟骨羊的遗传距离最远为1．4488；卡拉库尔羊与柯尔克孜羊的距离最近为01153。基于Nel氏(1972) 类。巴什拜羊、多浪羊、策勒黑羊、和田羊、塔什库尔干羊、叶城羊、卡拉库尔羊、柯尔克孜羊、青海黑臧羊、阿勒泰羊、巴音布 鲁克、哈萨克羊、青海白藏羊、湖羊、晋中绵羊为第一类；迪庆绵羊、宁蒗绵羊、鸟骨绵羊、腾冲绵羊和昭通绵羊为第二类；浪 卡子绵羊、郏县大尾羊、豫西脂尾羊、岗巴绵羊、江孜绵羊、安多绵羊和林周羊聚为第三类；小尾寒羊、太尾末羊、山地绵羊和 洼地绵羊聚为第四类。 关键词：绵羊；微卫星；遗传多样性；系统发生树。 我国绵羊种质资源丰富，拥有50个品种，其中包括地方品种31个、培育品种9个和引入品种10 个”J。随着外来品种的引入以及杂交改良、人工授精和胚胎移植等工作的深入开展，我国古老的地方家 畜品种受到严酷的竞争和排挤，以至造成地方品种的群体数量急剧下降，有的甚至濒临灭绝。据1999年 的调查表明，枣北大尾羊已经灭绝，兰州大尾羊处于濒危灭绝状态，汉中绵羊等品种处于濒危状态，我国 绵羊种质资源面临严重危机。根据目前绵羊品种资源不断匮乏，遗传多样性不断减少，本研究旨在通过 微卫星标记对中国31个绵羊品种进行种质资源的遗传学检测，探明绵羊品种内和品种间的遗传变异、亲 缘关系、群体遗传结构，为开展品种资源保护和开发利用工作提供参考依据。 1材料和方法 1．1实验材料 选取中国31个地方绵羊品种和1个外来品种(无角陶赛特绵羊)作为实验材料(表1)，每个绵羊品种 的样本含量基本上都在44～50之间。选择没有亲缘关系的个体，剪取耳组织约10mg，75％酒精浸泡低温 eta1． 带回实验室，冻存于一70℃冰箱中备用。基因组DNA提取采用常规的酚抽提法，具体参照Smnbrook (2002)方法。 表1 31个中国地方绵羊群体名称、来源及样本数量 ·基金项目：国家自然科学基金项目和基础性工作项目(2002DEBl0051) ．．作者简介：马月辉(1964—8)，男，吉林，主任，博士，博士生导师，畜禽种质资源．Email：yuehui．m@263net，Tel：010 1．2实验方法 1．2．1微卫星标记 个等位基因。本研究所用的引物是从GenBank等数据库网站查得，并从中筛选出符合要求的29个微卫星 BMS875，MB009，BM34137 BM3501、BMl341、BMSl678、BM彤107 BMl225、BM203，MB0237 7 1．2．2微卫星分析方法 PCR反应体系：Mgck(1．5mmol／L)1．2止或1．5gL，10xbtfffer1．2皿，dNTPs(0．2mmol／L)I．2皿， Primer 5．1—4．8 mk(0．5 DNA聚合酶(5．0 tmM／L)1．0汕，毙g U／扯)0．2～0．3止．，ddH20FL，DNA模板 (60耐皿)2．0止。 PCR反应程序：95℃预变性5rain，然后94℃变性30B，50—60‘c退火30s，72cc延伸30s，30—33个循 环后，72℃延伸10nfin，4。保存。 采用12％非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分离微卫星等位基因。应用柯达电泳凝胶呈像数码分析系统 KODAS (EASTMANEDAS)分析基因型和基因片段大小。 1．3统计分析 由于微卫星为共显性遗传，基因型直接反映表型，等位基因频率可通过简单计算获得。等位基因频 平均法(uPGMA)构建系统发生树。 2结果 2．1