G-CSF对心房、心室心肌细胞增殖的影响及p38+MAPK活性的研究.pdf

中文摘要 ● G．CSF对心房、心室心肌细胞增殖的影响及p38MAPK活性研究 中文摘要 急性心肌梗死(acute 疾病。过量的功能心肌细胞丢失是影响其预后的主要因素。以往认为心肌细胞是 终未分化细胞，近年研究发现，正常和病理状态下有增殖分裂的心肌细胞亚群 [I-4l。另外，成体心肌中存在具心脏干细胞特征的亚群体(Liftc．kit+细胞)，它能够 自我更新，克隆复制，多潜能分化，体内参与功能性心肌的新生15-91。因此，理 想的AMI治疗策略应能使心肌和血管再生，重建心功能。 基础研究和初步I临床试验证明， colony．stimulatingfactor。G．CSF)治疗，能够新生血管和心肌，促进修复过程，逆 转心室重构，改善心功能”¨71。G．CSF为AMI提供了有效的非侵入性的再生治 ● 疗新手段。G—CSF治疗心梗的益处，不仅是由于动员骨髓干细胞归巢至梗死区， 而且也归因于G-CSF对损伤心肌的直接作用(抗凋亡效应)ll““。 肌细胞系数目，但新生细胞并非骨髓来源而是心肌源性。 那么G．CSF是否直接 作用于心脏干细胞，促进其向心肌细胞的增殖分化?考虑到G．CSF对心肌细胞直 接作用并有促其他细胞增殖的作用，除抗凋亡外，它是否有直接促进心肌细胞分 裂效应?由于心脏干细胞主要分布于心房中，心房、心室的心肌细胞增殖状态是 MAPK信号传导途径在心肌细胞的增殖、凋亡和分化中起 否存在着差异?l抒p39 MAPK活性的改变? 重要调控作用，G．CSF对心肌细胞的直接作用是否涉及p38 ● 本课题首先观察了G．CSF对于不同部位(心房、心室)心肌细胞增殖的影响， MAPK活性是否变 同时对照比较心房心室肌细胞增殖有无差异， 然后检测p38 化， MAPK信号通路的关系。 初步探讨G．CSF对心肌细胞的直接作用及与p38 第一部分G-CSF对乳鼠心房、心室心肌细胞增殖的影响 目的：观察心房、心室心肌细胞增殖有无差异及G．CSF是否有促进乳鼠心肌细胞 增殖的作用。 方法：SD乳鼠心房、心室原代心肌细胞经10％FBS的DMEM培养液培养24h后， 加入干预因素并分别于加入干预因素后24h和72h两个时问点观察细胞增殖指 ● 复旦大学硕士论文论文2006 中文摘要 标。培养36h后更换为O．2％FBS的DMEM培养液。实验设2个大组：心房组、 ● 心室组。每大组分为2亚组：A．空白对照组。B．G—CSF组。G．CSF终浓度为100 ng／ml。每亚组重复3孔。以Brdu掺入测定DNA合成作为细胞增殖指标。 结果：1)心房+G．CSF组、心房对照组Brdu掺入指数均显著高于相应的心室 +G．CSF组、心室对照组(Po．05)。 组BrdU掺入率增高，有统计学趋势(P=0．12)。 结论：乳鼠心房肌细胞较心室肌细胞，处于相对活跃的增殖状态。G．CSF对心 肌细胞增殖分裂无显著影响，提示G—C