必威体育精装版地贫的筛查诊断和治疗.ppt

2. 微量血红蛋白电泳 设备：电泳仪，电泳槽 试剂：浸醋纤膜用Tris缓冲液，电泳槽用硼酸缓冲液，丽春红染液 溶血液制备：常用四氯化碳溶血法：去血浆→生理盐水洗杂质→蒸馏水溶血→四氯化碳溶解提取脂溶性物质→离心得Hb液。 电泳：取膜条，加溶血液于阴极端，然后电泳20-30分钟。 染色：取出膜条，丽春红染液，染数分钟，然后用3%醋酸溶液洗干净，可观察结果。 8.基因分析 缺失型α地贫 ▲提取DNA▲PCR扩增▲PCR产物电泳分离非缺型α地贫 β地贫和非缺失型α地贫 ▲提取DNA▲PCR扩增▲杂交▲洗膜▲显色 三、地中海贫血的治疗 1.重型β地贫患者的预期寿命 ●不输血的患儿期望寿命5岁，患儿常会出现包括不会走路，发生病理性骨折和面部畸形等严重症状，主要致死原因是贫血，肝功能损害，败血症和心衰。 ●不规则输血患儿期望寿命13-19岁，但生活质量极差，多死于长期贫血导致的心衰、败血症和肝功能损害。 ●规则高量输血但不用除铁剂期望寿命20岁以上。生活质量明显好于不规则输血，主要死因不再是贫血而是铁负荷过量所致的肝硬化、心衰和内分泌功能失调。 ●规则高量输血和使用除铁剂可长期存活。 2. 重型β地贫患者每月所花费用 按体重20kg计算该患者每月： 输红细胞2单位（240ml）约540元 注射除铁剂得斯芬30支约2100元 合计2640元左右 3 重型β地贫推荐的输血方案 ●维持血红蛋白在100g/L以上 方法：短期内连续多次输血使血红蛋白升至140g/L，然后每月输血一次，输血量为每公斤体重12ml红细胞（包括滤除白细胞红细胞、洗涤红细胞和浓缩红细胞）。 ●重型β地贫儿童，一般每月血红蛋白下降40g/L，而提高10g/L血红蛋白则每月每公斤体重需红细胞3ml，40g/L血红蛋白为12ml。每1单位红细胞有120ml，相当于200ml全血中红细胞。 4.重型β地贫的除铁治疗 4.1铁负荷过重导致多器官功能障碍 肝脏：肝纤维化、肝硬化 心脏：心包炎、心率失常、传导阻滞、心衰 垂体：生长发育及性成熟迟缓 胰腺：糖尿病 甲状腺：甲状腺功能低下 甲状旁腺：甲状旁腺功能低下 铁储积病 4.2骨髓移植重型β地贫患者分级及无病生存率 危险因素：①没有规则应用除铁剂②肝大③肝纤维化 一级：3个危险因素都没有，移植后无病生存率91% 二级：有1-2个危险因素，移植后无病生存率77% 三级：有3个危险因素，移植后无病生存率53% （重型β地贫患者输血和除铁治疗的要求就是不出现上述3个危险因素） 4.3 除铁剂的治疗指征和剂量 输血10-20次以上，或血清铁蛋白超过1000ng/ml时, 应该开始除铁治疗（但事实上肝组织铁含量与血清铁蛋白含量不相符，前者更准确）。1ml红细胞内含1.16mg铁，每年输12×12=144ml/kg红细胞，则每年体内增加167mg/kg铁。 铁蛋白 得斯芬 ＜2000ng/ml 25mg/kg/d； 2000-3000ng/ml 35mg/kg/d； ＞3000ng/ml 55mg/kg/d。 缓慢皮下注射或静脉注射，时间≥8h。每周5-7天。 当患者的血清铁蛋白≤300ng/ml时停止治疗。 足量并均匀间隔使用除铁剂是最理想的。 当血清铁蛋白≥5000ng/L时，过量铁将对患者脏器造成致命的损害。 应用微量注射泵皮下注射除铁剂 擦止痛膏 注射部位消毒 配置药液 皮下注射 固定微量泵 5.成份输血中红细胞种类的选择与评价 地贫患者只需要血中的红细胞，红细胞种类主要有滤除白细胞红细胞、洗涤红细胞和浓缩红细胞。 5.1 滤除白细胞红细胞：为红细胞悬液经去白细胞滤器过滤后所得的红细胞。经过滤可将血液中的白细胞、血小板及血清的附属物除去。因此可明显降低与白细胞相关的不良反应和输血相关疾病如非溶血性发热性输血反应，输血相关性移植物抗宿主病，免疫功能下降，细菌性输血反应和亲白细胞病毒如人类免疫缺陷病毒、巨细胞病毒和人Ｔ细胞白血病／淋巴瘤病毒的传染，还有提高机体细胞免疫功能，改善机体免疫状态的作用。地贫患儿需终身输血，应首选滤除白细胞红细胞，特别是预期要做骨髓移植的患儿。 5.2 洗涤红细胞：在严格的无菌条件下，用生理盐水反复离心洗涤红细胞悬液3-6次，尽可能多地移出血液内的白细胞和残余血浆，最后用生理盐水稀释而成，洗涤红细胞