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c.铁粒幼细胞性贫血 (曲线出现双峰) d.巨幼细胞性贫血(峰值右移,底部增宽) e.急性失血性贫血(峰值和曲线底部宽度均正常) 红细胞冷凝集干扰的直方图在37℃水浴前,红细胞直方图的曲线峰明显变低,而且在150~250fl可见一个很低的大细胞峰。标本在37℃水浴30min后测试,红细胞各参数值和直方图恢复到实际状态。 图40 红细胞冷凝集素对红细胞直方图的干扰 a.红细胞冷凝集水浴前 b.红细胞冷凝集水浴37℃后 应该指出,不同型号仪器的特点及使用稀释液不同,红细胞分布曲线的形状亦有差异,但反映病理变化的基本特征是相同的,上述内容只是描述的某一型号仪器的图形变化。在实际工作中,不同实验室应根据自身仪器的特点进行对比分析。 3、血小板直方图 见图41。 (1)正常直方图:正常血小板直方图是一条光滑、峰偏左的偏态曲线,分布在2~30 fl范围。 图41 血小板正常的直方图 (2)异常直方图: 由于血小板与红细胞在同一个通道内测量,而二者在体积上有明显的差异,故仪器设定了特定的阈值,将高于阈值者定于红细胞,反之为血小板。但红细胞群体中的小红细胞或细胞碎片可落在血小板的阈值内,巨大血小板或聚集的血小板可误认为红细胞,这些均可从血小板直方图上反映出来。另外,乳糜微粒、冷球蛋白颗粒和红细胞冷凝集等也可干扰血小板计数结果,但血小板直方图无明显的变化。 图42 不同干扰情况下的血小板直方图 a、大血小板直方图(曲线后半部分增宽和延伸) b、小血小板直方图(曲线后半部分缩窄) c、聚集的血小板直方图 (曲线后半部分上扬并延伸、血小板计数假性减低) d、聚集的血小板直方图 (曲线平坦并延伸、血小板计数假性减低) e、小红细胞干扰的血小板直方图 (曲线尾部抬高、延伸、血小板计数假性增高) (三)其它血液检验项目的检测方法 1、血红蛋白测定原理 稀释的血液加入溶血剂后释放出血红蛋白,后者与溶血剂结合形成稳定的血红蛋白衍生物。在特定波长(一般530~550nm)下比色,吸光度的变化与液体中的血红蛋白含量成比例。 2、红细胞压积的测定原理 绝大多数血细胞分析仪使用电阻抗法进行红细胞压积测定(Hct)。红细胞通过小孔时,由于电阻抗作用,产生脉冲,脉冲的多少即是红细胞的数量,脉冲的高度取决于单个细胞的体积。脉冲高度叠加经换算即可得到红细胞压积。有的仪器先以单个脉冲高度计算MCV,再乘以红细胞数得出红细胞压积。 3、电阻抗法进行白细胞计数 分析仪首先将血标本进行稀释(一般为1:250),加入溶血剂将红细胞溶解,在白细胞池中利用电阻抗法(库尔特原理)计数白细胞数。 4、电阻抗法进行红细胞和血小板计数 分析仪首先将血标本进行高倍稀释(一般为1:25000),在红细胞池中利用电阻抗法将大脉冲输入红细胞通道,将小脉冲输入血小板通道,从而得出红细胞和血小板数。 5、MCV(平均红细胞体积)、MCH(平均红细胞血红蛋白)和MCHC(平均红细胞血红蛋白浓度)的检测原理 它们都是根据仪器检测的红细胞数、红细胞压积和血红蛋白含量的数据,经内存电脑换算出来的,计算公式为: MCV(fl) = Hct/RBC MCH(pg)= Hgb/RBC MCHC(g/L) = Hgb/Hct 其中MCV对应的是红细胞直方图曲线的波峰。 表6 贫血的形态学分类 --------------------------------------------------------------------------- 形态学分类 MCV MCH MCHC 具体疾病举例 (fl) (pg) (g/L) --------------------------------------------------------------------------- 正细胞正色素 80-100 26-32 32-36 急性失血、急性溶 性贫血 血、再生障碍性贫血 小细胞低色素 80 26 32 缺铁性贫血、慢性贫 性贫血 失血、珠蛋白合成障碍 ---------------------------------------------------------------------------
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