PLgel凝胶色谱柱使用指南.pdf

PLgel凝胶色谱柱使用指南 为了尽可能延长一根凝胶色谱柱的寿命，请在使用前仔细阅读本说明。本说明仅针对PL公司 的PLGel凝胶色谱柱，如果您使用的是其它类型或其它公司的凝胶色谱柱，请注意并不是所有 内容均适用。 柱子安装 一般使用1/16” 不锈钢管来连接柱子，0.010” 内径适用于分析柱，0.020” 内径适用于制备， 连接管线应该尽量短来避免死体积，会造成系统性能下降。柱连接接头应使用与Parker 兼容 的1/16”锥箍和螺母，详见图1，请按照GPC柱的使用方向来连接，螺母应当在手拧紧后用扳 手再拧1/4圈就足够了，过分拧紧并不会改善密封，反而会损坏螺纹造成泄漏。 图 1 Compatible Connectors 在图1中的X＝0.090” ，约等于2.28毫米，螺母的最小长度应为0.210” ，约为5.33毫米，请不要 使用Waters和Rheodyne公司的产品，他们与PL的柱子并不兼容。 图 2 在安装柱子时，请不要将扳手放在图2所示X处，应当放在柱未端六角处。在与其它的柱子相 连之前，建议将柱子与泵相连，用少量流动相清洗一下连接管内部和接头。 流速 对于传统的7.5毫米内径的GPC柱子，1.0ml/min是一个最优化的流速，当柱子的内径增加或减 少时，应当适当调整体积流速来保证等效的线速度。 表1给了大家一个推荐的流速，然而对 于一些高粘度的流动相，应当适当减小或升高温度，如果要更换溶剂，流速要逐渐升高，无 论如何，都不要在超过柱子的最大压力下使用柱子（详见表3）。 表 1 柱型 适用流速 (ml/min) 建议流速 (ml/min) PLgel 7.5mm ID PLgel 0.5 – 1.5 1.0 MiniMIX 4.6mm ID PLgel 0.2 – 0.5 0.3 Prep 25mm ID 5.0 – 20.0 10.0 样品制备及进样 根据样品的分子量来优化样品浓度毫无疑问是最好的方式。宽分布样品通常可以比窄分布样 品使用更大的浓度。过载并不会损坏柱子，但是你会得到不好的峰型和错误的结果。为了避 免堵塞，我们推荐样品用0.52微米的过滤器过滤样品，当然预柱同样会保护您的分析柱。 进 样量过大会造成谱带展宽，降低系统效能，尤其是对于高效柱和窄口径柱，PL推荐的进样量 详见表2。 表 2 柱子类型 推荐百分比浓度(%) 推荐进样量 (µl) PLgel 7.5mm ID PLgel 0.05 – 0.50 20 – 200 MiniMIX 4.6mm ID PLgel 0.01– 0.20 1 – 50 Prep 25mm ID 0.5 – 5.0 500 –2000 表 3 PLgel PLgel PLgel PLgel PLgel 柱子类型 3µm 5µm 10µm 20µm Prep 10µm 通常工作压力 (bar)1 50 30 10 3 25 最大工作压力 (bar) 180 150 150 150 150 最大工作温度 (°C)2 110 150 210 210 150 注1： THF at 20°C, PLgel 300x7.5mm at 1.0ml/min, PLgel MiniMIX250x4.6mm at 0.3ml/min, PLgel Prep 300x25mm at 10ml/min. 注2 ：在非常高的温度下使用柱子，寿命会有所缩短。 流动相 PLgel适用的有机溶剂非常广泛，可以在溶解参数7－14