蛋白质化学总论和氨基酸精要.ppt

高效液相色谱(High performance liquid chromatography, HPLC) 曾称高压液相色谱，以液相色谱为基础，在经典液相色谱实验和技术基础上建立的一种液相色谱法。快速、灵敏、高效的分离和分析技术。 固相支持物的颗粒很细，表面积很大；溶剂系统采取高压，洗脱速度快。多种类型的柱层析都可以用HPLC代替，如分配层析、离子交换层析、吸附层析、凝胶过滤等。 References GC Barrett: Chemistry and Biochemistry of the Amino Acids. Chapman Hall, 1985. Greenstein Winitz: Chemistry of the Amino Acids. John Wiley Sons Inc, 1961. Cohen: Science 267, 1265-1266. CR Cantor PR Schimmel: Biophysical Chemistry, pt I, Freesman, 1980 DL Nelson MM Cox: Lehninger Principles of Biochemistry (4th edition) * * * * * * * * * * * * * 巯基（-SH）的反应-侧链基团的反应 作用：氧化还原反应可使蛋白质分子中二硫键形成或断裂。 巯基的氧化及二硫键的还原 巯基（-SH）的反应-侧链基团的反应 + 6HCOOH 6HCOOOH 作用：氧化还原反应可使蛋白质分子中二硫键断裂。二硫苏糖醇(DTT)也可以用来打开胱氨酸上的二硫键。 DTT 巯基（-SH）的反应-侧链基团的反应（与碘乙酸反应） 羟基的反应-侧链基团的化学性质 二异丙基氟磷酸酯, DFP、DIPF、DIFP +HF 作用：可用于修饰蛋白质。 氨基酸的应用 氨基酸的应用-医药工业 氨基酸输液 必需氨基酸：甲硫氨酸、色氨酸、赖氨酸、缬氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、苏氨酸 (假设来写一两本书） 半必需氨基酸：精氨酸、组氨酸是幼儿所必需的。 必需氨基酸 作 用 Leu 促进睡眠、减缓疼痛、缓解酒精中毒 Lys 减低感染、提高注意力、帮助脂肪酸分解 Phe 降低饥饿感、改善记忆、消除抑郁 Ile/Val Hb形成所必需、调节糖和能量水平、修复肌肉组织、加快愈合、防治肝衰竭 Thr 协助蛋白质吸收利用、防止肝中脂肪积累、促进抗体生成增强免疫 Met 帮助分解脂肪、可预防脂肪肝/心血管及肾脏疾病、消除重金属及抗氧化 Trp 减轻焦燥不安、促进睡眠、控制酒精中毒 氨基酸的应用-治疗药剂 Arg：对治疗高氨血症、肝机能障碍等疾病颇有效果； Asp：钾、镁盐可用于恢复疲劳；治疗低钾症心脏病、肝病、糖尿病等。 Cys：能促进毛发生长，可用于治疗秃发症；甲酯盐酸盐可用于治疗支气管炎等； His：可扩张血管，降低血压，用于心绞痛，心功能不全等疾病的治疗。 氨基酸的应用-食品工业 营养强化剂； 谷氨酸单钠盐—味精； 天冬氨酸钠：可用于清凉饮料，能增加清凉感并使香味浓厚爽口； 天冬氨酰苯丙氨酸甲酯：甜味素（APM） 氨基酸的应用-农业 杀虫剂：刀豆氨酸、5-羟色氨酸可使南方毛虫拒食而死；半胱氨酸可杀死黄瓜蝇；甘氨酸乙酯衍生的二硫代磷酸盐具有较强的杀蚜虫和杀螨效果； 杀菌剂：N-月桂酰缬氨酸可用作治疗稻瘟病；?-1，4环己二烯丙氨酸能抑制黑穗病毒、稻瘟病等； 除草剂：如N-3,4-二氮丙氨酸，硫代氨基酸酯等。 氨基酸的应用-化妆品 氨基酸能调节皮肤pH的变化，对细菌有抑制作用，也可作为皮肤、毛发的营养成分，增加皮肤、毛发的光泽。 防止皮肤干燥的天然保湿因子（NMF）的主要成分是甘氨酸、羟基丁氨酸、丙氨酸、天冬氨酸、丝氨酸等游离氨基酸。 在化妆品中添加天冬氨酸或其衍生物以及一些维生素，可防止皮肤老化。 氨基酸的应用-化学工业 维生素B6: 可采用丙氨酸或天冬氨酸为原料合成。 叶酸：需要用谷氨酸为原料合成。 氨基酸表面活性剂：酰基谷氨酸钠、十六烷基-L-赖氨酰-L-赖氨酸甲酯二盐酸、月桂酰-L-精氨酸乙酯盐酸等具有较强的抗菌杀菌活性，且无刺激性。 聚合氨基酸：聚谷氨酸甲酯可用于作为合成皮革的表面处理剂；聚天冬氨酸或聚谷氨酸的二烷基酯与磷酸高级烷基酯结合得到的化合物可作为可塑剂，稳定剂等。 氨基酸的鉴定、分离纯化 氨基酸的鉴定 凡是具有游离氨基的氨基酸（α-氨基酸）能与茚三酮试剂反应，生成紫色化合物。这种反应非常灵敏，是鉴定α-氨基酸（除脯氨酸为淡黄色外）的最简便、最迅速的方法，可用于?-氨基酸的比色测定和纸层析的显色。 茚三酮试剂：0.2%的茚三酮酒精（95%酒精）溶液。 氨基酸的分离分析 分配柱层析：支持剂是一些具