血凝仪检测原理及应用精要.ppt

凝血仪的检测原理 及应用 （一） 凝血常规（常规凝血功能筛选组合） 1. 凝血常规1（6项）： PT、APTT、TT、Fib-C、D-二聚体、AT-Ⅲ 适合于：干部病房、ICU病房、呼吸内科、消化内科、血液内科、产科、肿瘤科、心内科、肾内科和术后出血患者等，以及其它科室60岁以上高危人群。 2. 凝血常规2（4项）： PT、APTT、TT、Fib-C 适合于：一般手术患者。 （二） DIC筛选试验组合： PT、APTT、TT、Fib-C、D-二聚体、FDP、AT-Ⅲ （三）血友病组合： PT、APTT、TT、Ⅷ:C、Ⅸ:C、Ⅷ抑制物检查 （四） 凝血因子全套检查： PT、APTT、TT、Fib-C、Ⅱ:C、Ⅶ:C、Ⅷ：C、Ⅸ:C、Ⅹ:C、Ⅺ：C （五）药物性出血的监测 1. 口服华法林治疗监测组合：PT 2. 普通肝素治疗监测组合： TT、APTT、AT-Ⅲ 3. 溶栓药物治疗（SK、UK、t-PA）监测组合： PT、APTT、D-二聚体、TT、Fib-C、FDP 三个阶段，两个途径（内源性、外源性） 凝子因子参与的凝血途径 内源性凝血途径：Ⅷ，Ⅸ，Ⅺ，Ⅻ 外源性凝血途径：Ⅲ，Ⅶ 共同凝血途径：Ⅰ，Ⅱ，Ⅴ，Ⅹ，ⅩⅢ 传统的凝血途径的修改 外源性的Ⅶ因子在组织因子的结合下既可激活Ⅹ因子，又可激活内源性的第Ⅸ因子，从而打破了内源与外源的界限。 Ⅻ因子缺乏时并不引起出血，这说明第Ⅺ因子并不一定只被Ⅻ因子激活，现已证明Ⅺ本身具有自身激活作用。 凝血酶（Ⅱ因子）也可激活Ⅺ因子，原来认为只有Ⅻ因子才能激活Ⅺ因子。 TF被激活并与Ⅶ因子结合后会被一种组织因子途径抑制物（TFPI）所抑制；后者已成为一种新型抗凝剂。 二、凝血检验标本收集和预处理 （一）标 本 采 集 1. 抽血注意事项 （1）抽血管首选优质塑料管； （2）定量抽血完毕，立即将标本轻柔颠倒混匀5次，避免剧烈摇动； （3）许多专家建议抽血的第一管血不用作血栓试验，尽量选第二管。 Hct异常时抗凝剂和抽血量 高Hct的影响 病例：真性红细胞增多症患者，Hct 0.562 （1）1：9比例抗凝结果（错误）： PT 19.2s，PT-INR 1.78，APTT 62.1s， Fib-C 1.67g/L，TT 22.9s，与临床不符。 （2） 0.2 0.00185×（100-56.2） 计算后应抽血2.5ml，结果（正确）为： PT 13.9s，PT-INR 1.30，APTT36.2s， Fib-C 1.70g/L，TT 19.7s，与临床相符。 （四）分离后血浆标本的处理 1. 建议将标本保存在-70℃以下条件，凝血因子至少可稳定6个月； 2. 短期保存可在-35℃条件，-20℃条件通常是不理想的； 3. 冷冻血浆解冻应放置37℃水浴条件，并轻轻摇动4～5分钟，分析前轻柔地颠倒混匀。室温放置自然解冻是不可取的，因室温放置会有冷沉淀形成，Ⅷ:C和vWF会减少，并有纤维蛋白原析出。冷冻过的血浆不能再次冷冻。 凝血途径示意图 三、凝血酶原时间测定（PT） PT检测的原理 在受检血浆中加入过量的组织凝血活酶和钙离子，使凝血酶原变为凝血酶，后者使纤维蛋白原与转变为纤维蛋白。观察血浆凝固所需的时间即为凝血酶原时间。CA1500仪器法判断终点采用光学法，即当纤维蛋白原转变为纤维蛋白时，经光照后产生的散射光发生变化，仪器判读终点。 （二）临 床 应 用 1. 延长 （1）见于先天性外源凝血因子（Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、 Ⅹ）缺乏症和低/无FIB血症，凝血因子Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、 Ⅹ轻微减少，PT的延长幅度也不大，Ⅱ因子减少病人，其PT经常在正常范围； （2）口服抗凝药，如华法令等； （3）维生素K缺乏症； （4）DIC及原发性纤溶症； （5）肝脏疾病； （6）血中有抗凝物质（狼疮抗凝物、抗磷脂抗体、肝素、FDP以及抗Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、 Ⅹ 的抗体）。 MNPT的确定方法 标本：多份混合血浆（20份以上） 年龄：18-55岁 性别：男、女（非妊娠、非经期）各半 药物的影响： 激素、抗生素、口服避孕药、降压药、维生素 采血前的要求：勿剧烈运动空腹或只服少量无脂类食物 四、 活化部分凝血活酶時間 （APTT） APTT检测的原理 37℃条件下，以白陶土（激活剂）激活因子Ⅺ和Ⅻ，以脑磷