血培养实验室操作(顾敏红)演示文稿精要.ppt

蠡湖街道社区卫生服务中心 锡山人民医院 顾敏红 （一）血流感染定义 是指各种病原微生物侵入血循环，在血液中繁殖，释放毒素和代谢产物，并诱导细胞因子释放，引起全身感染、中毒和全身炎症反应( SIRS)，进一步导致血压下降、凝血和纤溶系统的改变，引起全身多器官功能障碍综合征(MODS)，是一种严重的全身感染性疾病。 （六）采血要求 皮肤消毒：推荐使用碘酊、次氯酸和洗必泰或碘伏作为皮肤消毒剂 说明：碘酊、次氯酸和洗必泰的消毒效果要优于碘伏；消毒剂要有足够的作用时间以保证消毒效果（碘酊作用30秒；碘伏作用1. 5-2分钟）；洗必泰的作用时间和碘酊一样，但没有过敏反应，因此在静脉穿刺完成后不必擦去，但不能用于小于2个月的婴儿。 采集部位：推荐从外周静脉采集血液标本。（说明：不建议采集：动脉血，因其诊断价值不大；静脉留置导管，因其常伴有有高污染率，如果必须从留置导管内采血，也应同时从外周静脉采集另外一个血培养标本，以帮助阳性结果的判读。） 如何减少污染：1、在采血皮肤消毒前，血培养瓶的橡皮塞需使用70%异丙醇酒精消毒并干燥，然后再进行穿刺部位的皮肤消毒。2、严格按照皮肤消毒步骤操作（酒精、碘酊、酒精），并等待足够的消毒时间。3、严格无菌操作，不允许在消毒后按压静脉，除非带有无菌手套。4、不推荐采血后更换注射器针头接种血培养瓶，采用真空采血装置能降低污染率。 （七）标本的运送要求和拒收标准 1、运送要求 采集后的血培养瓶应在1小时内送往实验室。 接种前或后的血培养瓶均不得冷藏或冷冻。 2、拒收标准：如遇以下情况，实验室应拒收并要求重送。 标签错误或未贴标签。 血培养瓶破损或渗漏。 血液凝固。 三、血培养标本分离病原菌的关键要素 培养设备：提倡使用全自动血培养仪，可以更早发现病人的菌血症。 采血量：从血标本中分离细菌和真菌依赖于适当的采血量。 血、肉汤比例：正常人血液内包含有抑制微生物生长的物质（例如：补体、溶菌酶、抗体、抗生素（假如病人采血前已接受抗生素治疗））。为了减少这些抑菌因子浓度从而降低其抑菌活性，通常血．肉汤比例：为1:5到1:10，一些商品化血培养瓶使用的血。肉汤比例小于1:5是因为在其中增加了与血中抑制因子结合并使其失活的特殊物质；儿科病人的血标本可以被接种入专为儿科设计的血培养瓶，这些瓶子可以接种较少的血容量却保持了合理的血．肉汤比例。 培养基的选择：推荐使用商品化的培养基。若患者已行抗菌药物治疗，则应选择含有抗菌药物吸附剂（如树脂或活性碳）的培养瓶，其目的增加细菌的分离率和分离速度。  三、血培养标本分离病原菌的关键要素 孵育条件：1、温度：细菌和真菌血培养需要在标本采集和运输至实验室后孵育于35℃，全自动血培养仪设置的温度一般为35℃。2、气体：商品化的需氧血培养瓶中加入了不等量的二氧化碳，厌氧瓶中则加入了二氧化碳和氮气以利于不同种类细菌的生长。 培养周期 :自动血培养仪的标准血培养周期为5天，传统的手工方法推荐孵育7天。全自动血培养仪5天后阴性标本无需进行常规转种。说明：尽管研究表明95%-97%的有临床价值的细菌会在3-4天内被自动血培养系统检出，目前仍然推荐5天的培养周期。特殊情况可适当延长培养时间（如临床怀疑军团菌感染可延长培养至10天；怀疑布鲁氏菌感染可延长培养至28天）。 培养瓶摇动 :摇动血培养瓶，特别是在孵育的最初24小时内，能增加提高需氧瓶中微生物的检出率和检出速度。目前使用的全自动血培养仪是持续的摇动血培养瓶的。 监控频率:以琼脂基质作为血培养的组成部分的双向血培养瓶，需每天进行目测检查来检查细菌生长情况。全自动血培养仪系统要求设定规律的10-24分钟时间间隔来监测需氧血培养瓶和厌氧血培养瓶中细菌生长曲线。当出现提示生长的阳性信号时进行次代培养。  四、结果报告原则及结果分级报告制度 （一）培养结果报告原则 紧急处理和优先原则：血培养的结果，无论阴性和阳性结果，对患者的治疗都很紧急！ 建议在有条件的医院，通过医院信息系统，让临床医生随时掌握血培养检测的进展情况，该系统应包括： 血培养已开单但未收到 血培养已收到，符合采样要求 血培养已收到，不符合采样要求 检测中，尚无结果 24小时无生长 48小时无生长 阳性报警，分离培养和药敏进行中， 初步涂片染色结果 阳性培养结果（细菌鉴定和药敏试验的最终结果） （二）血培养结果的分级报告制度 初步报告：紧急口头（电话）报告 血培养出现阳性报警60分钟内，立即进行革兰染色、显微镜镜检，并将结果向临床主管医生进行紧急口头（电话）报告，并在4小时内将数据录入信息系统。口头报告包含以下