血清LDH同工酶测定精要.pptVIP

关于同工酶 1957年Markert等人用电泳的方法将纯 化的心肌乳酸脱氢酶(LDH)分离出5条区 带，由阳极到阴极依次命名为LDH1、LDH2、 LDH3、LDH4、LDH5，它们均具有LDH催化 活性，从而首先在1959年提出了同工酶的 概念。 同工酶的应用 同工酶的应用 同工酶的应用 是否人种间在差异呢？这个答案不 得而知，但有一点是明确的，那就是LDH同 工酶在人体不同器官和组织间是有差异的， 从医学角度来讲，利用这种特异性临床上对 LDH同工酶的检测可作为某些疾病诊断的依据 之一。 同工酶的应用 乳酸脱氢酶同工酶 柱层析法 免疫化学法 热稳定性和抑制法 *电泳法： LDH 在电泳中的分离因素 电荷因素 蛋白质分子形状和大小相同，所带电荷性质和数量不同 分子大小 蛋白质分子形状和所带电荷性质和数量相同，分子大小不同 分子形状 蛋白质分子所带电荷性质和数量相同，分子形状不同 缓冲液条：内含pH 8.4、离子强度0.075的巴比妥缓冲液 缓冲琼脂糖凝胶板：内含0.08mol/L， pH 8.3巴比妥-盐酸缓冲液EDTA-Na2溶液（10mmol/L），5g/L琼脂糖 底物显色液（临用前配制） 固定漂洗液 打开仪器，选择电泳程序 点样、保湿，放电极架、挂缓冲条、放凝胶板 放点样梳、电泳，配显色液 加显色液 吸掉显色液、加固定液 吸掉固定液、放厚滤纸 烘干 胶片扫描 4、计算 A总（吸光度总和）= A1 + A2 + A3 + A4 + A5 （A1-A5 相应为LD同工酶LD1-LD5的吸光度。） LD同工酶的百分比（%）为： LD1 = A 1/ A总 × 100% LD2 = A 2/ A总 × 100% LD3 = A 3/ A总 × 100% LD4 = A 4/ A总 × 100% LD5 = A5 / A总 × 100% 5、注意事项 不宜用溶血标本。 严格控制温度（LD4和LD5，特别是LD5对热敏感，如底物显色液温度超过50℃，LD5易失活）。 底物显色液需避光保存，因PMS对光敏感，否则显色后的凝胶板背景颜色深而影响结果。 LD同工酶对冷的敏感性不同，尤其是LD5对冷不稳定。因此血清标本应该放室温保存 6、图谱分析-1 6、图谱分析-1 6、图谱分析-1 6、图谱分析-2 6、图谱分析-2 6、图谱分析-2 6、图谱分析-2 6、图谱分析-3 6、图谱分析-3 6、图谱分析-3 6、图谱分析-3 6、图谱分析-4 6、图谱分析-4 6、图谱分析-4 6、图谱分析-4 南昌大学医学院 LDH5↑：骨骼肌损伤(杜氏肌营养不良、横纹肌融解症、肌肉外伤) 煤矿、钨矿矽肺病人的血清LDH1、LDH2下降，LDH4、LDH5升高 肾髓质以LDH4和LDH5活性较强。患急性肾小管坏死、慢性肾盂肾 炎、慢性肾小球肾炎以及肾移植排异时，血清LDH5均可↑ 南昌大学医学院 恶性肿瘤 南昌大学医学院 恶性肿瘤LDH 增高多为中间型，以LDH3 为 主，LDH3 ＞LDH1,总LDH 越高预后越差。 LDH2、LDH3↑：肺癌、粒细胞白血病 南昌大学医学院 不同肿瘤患者血清乳酸脱氢酶正常和升高者其同工酶的水平观察分析 摘　要：目的　为了探讨不同肿瘤患者血清乳酸脱氢酶(LDH)正常和升高者 其同工酶是否一致。方法　用琼脂糖凝胶电泳法对309例血清LDH正常和 276例LDH升高的不同肿瘤患者以及37例正常人的LDH同工酶水平进行观察 .结果　血清LDH活性正常的不同肿瘤患者LDH同工酶存在着LD3↑的普遍 规律，与正常对照组存在着非常显著性差异；血清LDH活性升高的不同肿 瘤患者LDH同工酶存在着LDH3/LDH4/LDH5↑的普遍规律,与正常对照组相比 差异有非常显著性。结论　LDH同工酶可作为恶性肿瘤患者诊断的参考指 标，特别是LDH活性正常的肿瘤患者同样存在着LDH同工酶谱的异常， LDH3↑是恶性肿瘤的早期特征之一。 南昌大学医学院 肺含LDH3较多，肺部疾患时血清LDH3常可 升高。肺梗塞:LDH3=LDH4↑，LDH1↓↓； 肺脓肿:LDH3、LDH4常与LDH5同时↑ LDH3 、LDH4 ↑:淋巴瘤、结缔组织疾病和 凝血紊乱（血小板增多症、凝血活酶释放）。 小结 南昌大学医学院 LDH同工酶分类1.ppt、测方法2.ppt LDH同工酶测定原理3.ppt LDH同工酶检测的临床意义4.ppt（图谱分析） 1、LDH是由两种不同的亚基组成的四聚体，形成以下5种结构不同的同工酶 A.LD1（H4）/LD2（H3M1）/LD3（H2M2