血细胞分析仪检测原理与影响因素精要.ppt

血细胞分析仪检测原理与影响因素 前言 传统的血常规分析法完全采用手工法。 20世纪50年代，库尔特（W. H. Coulter）先生根据电阻抗原理，又称库尔特原理，生产出第一台血细胞计数仪，开创了血细胞分析仪的新纪元，使人工计数实现自动化。 随着科学技术的发展，血细胞分析仪也日新月异，目前己普及至县或卫生院。 前言 美国COULTER公司的STKS、MAXM系列血细胞分析仪 --电阻抗、高频电导及激光散射联合检测法 Bayer?公司的Advia120?型和新近推出的Advia 2120?型血细胞分析仪 --激光和细胞化学法 日本东亚公司的NE1500、SYSMEX公司的SE9000血细胞分析仪--电阻抗和射频电导联合检测法 ABBOTT公司的CD3000，CD3500血细胞分析仪--多角度激光偏振光散射检测法 血细胞分析仪的主要功能 血细胞计数功能 测量WBC、 RBC 、 PLT 、MCV、RET等 白细胞分类功能 测量NE%、LYM%、MO%、EO%、BA%等 血红蛋白检测功能 测量HGB 血细胞计数的检测原理 电阻抗法 流式细胞术与光散射法检测原理 电阻抗法检测原理 血细胞具有相对非导电的性质 电阻抗法检测原理 电阻抗法影响因素 白细胞: 电阻抗法影响因素 流式细胞术与光散射法检测原理 白细胞计数 红细胞和血小板计数 网织红细胞计数 有核红细胞计数 流式细胞术与光散射法检测原理 白细胞计数 流式细胞术与光散射法检测原理 红细胞和血小板计数 流式细胞术与光散射法检测原理 红细胞和血小板计数 流式细胞术与光散射法检测原理 网织红细胞计数 流式细胞术与光散射法检测原理 仪器还可提供网织红细胞成熟指数（reticulocyte mature index，RMI）。 RMI= 流式细胞术与光散射法影响因素 流式细胞术与光散射法影响因素 接受全肠道外营养的(TPN)病人样品，其中包括高脂剂，可能出现血小板计数假性升高。这些样品能够包含脂滴，并且这些脂滴会出现在血小板计数区域。 白细胞分类的功能 白细胞二分群、三分群计数原理 白细胞五分类计数原理 白细胞二分群、三分群计数原理 根据电阻抗的原理，不同体积的白细胞通过小孔时产生的脉冲大小有明显的差异，根据脉冲的大小，血细胞仪对白细胞进行分群。 白细胞二分群、三分群计数原理 根据电阻抗的原理，不同体积的白细胞通过小孔时产生的脉冲大小有明显的差异，根据脉冲的大小，血细胞仪对白细胞进行分群。 白细胞二分群、三分群计数影响因素 电阻法只是根据细胞体积的大小，将白细胞分成几个群体。在一个群体中，可能发某种细胞为主（如小细胞区主要是淋巴细胞），但由于细胞体积间的交叉，可能还有其它细胞的存在。任何一类白细胞的增多，均可使直方图产生相似变化，直方图只是提示检查者粗略判断细胞比例变化或有无明显的异常细胞出现，进而在显微镜下检查中注意这些变化，实际分类以手工分类为准。 容量、电导、光散射法检测原理 在测试的标本内加溶血剂，使红细胞溶解 容量、电导、光散射法检测原理 电阻抗原理：检测细胞体积 容量、电导、光散射法检测原理 容量、电导、光散射法影响因素 幼稚细胞等白血病细胞使分类异常 未成熟粒细胞与核左移细胞常引起MO%假性升高 激光与细胞化学法检测原理 血样和过氧化物酶试剂混合后，溶解RBC 激光与细胞化学法检测原理 根据胞浆中过氧化物酶染色深浅和激光法测量的细胞大小不同，将白细胞分成嗜酸性粒细胞、单核细胞、中性粒细胞、大而未染色细胞、淋巴和嗜碱细胞 淋巴和嗜碱性粒细胞由于大小相似而不能分开。 激光与细胞化学法检测原理 嗜碱性粒细胞/分叶核通道 激光与细胞化学法检测原理 当嗜碱性粒细胞与其它被溶解了细胞膜的细胞核流入激光二维检测系统，根据前向角和散射角检测的结果，产生了二维细胞图，进而将白细胞进一步进行分类。结合根据过氧化物酶通道的结果，将白细胞进行完整的分类。 激光与细胞化学法影响因素 病理情况下，嗜酸粒细胞分类受标本白细胞形态异常影响假性升高 幼稚细胞等白血病细胞使分类异常 电阻抗与射频法检测原理 嗜酸性粒细胞检测系统：血液进入仪器后，经分血器使血液与嗜酸性粒细胞特异计数的溶血剂混合，由于其特殊的PH，使除嗜酸性粒细胞以外的所有细胞溶解或萎缩，含有完整的嗜酸性粒细胞的液体通过小孔时，使计数电路产生脉冲而被计数。 电阻抗与射频法检测原理 淋巴、单核、粒细胞（中性、嗜碱性、嗜酸性）的检测系统： 电阻抗与射频法检测原理 幼稚细胞检测系统： 此胞膜上脂质较成熟细胞少的现象，在细胞悬液加入硫化氨基酸后，由于细胞上脂质占位不同，故结合在幼稚细胞的硫化氨基酸较成熟的细胞多，且对溶血剂有抵抗作用。 当加入溶血剂后，成熟细胞被溶解，如果悬液中存在幼稚细胞