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内蒙古师范大学体育学院 本科学生毕业论文 论文题目：???????????????????????????? 姓 名： 学 号： 系 别： 专 业： 指导教师： 李旭辉 副教授 ???????????????????? 目 录 几丁聚糖对力竭游泳小鼠红细胞自由基代谢的影响 姓名 000000 学号0000000 指导教师：000000 摘要 目的： 探讨补充4周几丁聚糖对一次力竭运动小鼠红细胞自由基代谢及ATP酶活性的影响。方法：昆明系小鼠36只随机分为安静组、力竭组、药物组，每组12只。药物组补充几丁聚糖，每日按0.33g /kg体重的剂量灌胃，补充4周以后力竭组和药物组进行力竭游泳测试，记录游泳至力竭时间，测定红细胞MDA含量、SOD、 GPH-Px、Na+-K+-ATP酶和Ca2+-Mg2+-ATP酶的活性。结果: 药物组小鼠游泳至力竭时间明显延长；力竭运动后力竭组小鼠红细胞MDA含量显著高于安静组，红细胞SOD、 Na+-K+-ATP酶及Ca2+-Mg2+-ATP酶活性均显著低于安静组；药物组力竭运动后红细胞MDA含量显著低于力竭组，红细胞SOD、Na+-K+-ATP酶和Ca2+-Mg2+-ATP酶活性均显著高于力竭组；三组间GSH-Px活性均无显著性差异。结论: 补充几丁聚糖能明显降低力竭运动导致的红细胞自由基过氧化损伤、提高红细胞抗氧化酶活性、抵抗力竭运动导致的红细胞ATP酶功能下降，并且可以延长小鼠游泳至力竭时间。 关键词 几丁聚糖; 力竭运动; 红细胞 ;自由基; ATP酶 几丁聚糖（Chitosan）是一种存在于海洋节肢动物外壳，菌类、昆虫类、藻类细胞膜和高等植物的细胞壁之中的天然氨基多糖，于1991年被欧美日的营养学家誉为生命的“第六要素”，也是迄今为止自然界中唯一被发现的可食用阳离子动物纤维。几丁聚糖作为一种具有特殊生理功能的营养物质，以往研究主要集中在提高机体免疫能力方面，在近年，临床及药学方面也报道几丁聚糖具有清除自由基的功能[1-3]， 但几丁聚糖在运动领域的研究报道很少，朱柯曾报道补充几丁聚糖具有提高运动员安静及大强度以后红细胞的免疫能力[4]，但关于几丁聚糖对力竭运动红细胞自由基代谢的影响未见报道。鉴此,本实验建立一次性力竭运动动物模型，全面探讨补充几丁聚糖对红细胞自由基代谢、ATP酶活性以及小鼠运动能力的影响，为几丁聚糖应用于抗运动疲劳开发提供实验依据。 1 材料与方法 1.1材料 雄性昆明系（KM）小鼠36只，5周龄，体重18－23克，由中国医科大学第二附属医院动物中心购入，常规分笼喂养，自由饮水和摄入基础饲料，环境温度20－25℃，相对湿度50~60%每天通风换气，每两周消毒一次。 几丁聚糖为日本三荣工业株式会社产品“救多善”，其几丁聚糖含量为93.66%，由日本海红蟹脚壳提取的几丁质脱乙酰而成。 1.2 分组及给药 适应性饲养一周后随机分为3组，每组12只：安静组：常规安静饲养，每天按0.1ml/10g体重的量灌胃给温开水一次，持续四周。力竭组：常规安静饲养，每天按0.1ml/10g体重的量灌胃给温开水一次，持续四周。药物组：常规安静饲养，灌胃法补充几丁聚糖，几丁聚糖量为每天0.33g /kg体重，按体重称取几丁聚糖后溶解于0.1ml/kg体重的温开水中, 持续灌服四周。四周后在进行力竭游泳实验时力竭组和药物组各有一只小鼠在力竭游泳出水后死亡，无法取血测定，为了便于统计处理，安静组也随机去掉一只，最后测试样本每组为11只。 1.3 力竭游泳测试方法 饲养四周后，力竭组和药物组小鼠做一次力竭游泳实验。水温32士2℃，水深45cm，记录小鼠游泳至力竭时间，力竭判断的标准为:小鼠头下沉10秒不上浮，放在平面上无法完成翻正反射。 1.4取材 力竭后小鼠摘眼球取血，肝素抗凝。 1.5 红细胞MDA测定 红细胞MDA抽提液的制备：取肝素抗凝血150ul，加入3ml的生理盐水，1500转/分 离心5分钟，弃上清液，留沉淀的红细胞，加入蒸馏水0.6ml，再漩涡混匀器上混匀1分钟使红细胞溶解，加入95％的乙醇0.3ml放置于漩涡混匀器充分混匀30秒，，再加入三氯甲烷0.3ml放置于漩涡混匀器充分混匀一分钟， 3500转/分 离心8分钟取上清液即为红细胞MDA提抽液。取0.8ml红细胞MDA提抽液用亚