益气活血法影响肺纤维化大鼠胶原动态变化.pdfVIP

益气活血法影响肺纤维化大鼠胶原的动态变化* 1 2 翟华强 ，杨毅 1 北京中医药大学中药学院，北京 （100102 ） 2 湖北中医学院附属医院呼吸内科，武汉 （430060 ） E-mail ：zhaihq999@ 摘 要：目的：动态观察益气活血中药对肺纤维化大鼠在不同时间、不同部位的胶原变化。 方法：将80 只雄性SPF 级Wistar 大鼠随机分为4 组，即假手术组、模型组、益气活血组及 氢化可的松组；气管内注入博莱霉素A5 复制大鼠肺间质纤维化模型。于第7d、第28d 分两 批处死大鼠，分别运用天狼星红特染与苏木素－伊红染色，对比观察肺间质纤维化形成的病 理变化及不同时间、不同部位Ⅲ/ I 胶原比值的动态变化。结果：7d 肺泡炎阶段时，Ⅲ/ I 型 胶原比例与模型组无明显差别。第28d 肺纤维化阶段，益气活血治疗后能明显减轻肺纤维化 程度及肺间质中I 、Ⅲ型胶原蛋白含量；与模型组比较，益气活血组的Ⅲ/ I 胶原比值明显升 高(P0.05 ）。结论：益气活血组能减慢肺间质纤维化的进程，对肺间质纤维化有一定的保护 作用。 关键词：肺纤维化；胶原；动态变化 矽肺是由于粉尘所致弥漫性肺泡炎和肺泡结构紊乱并最终导致肺间质纤维化的疾病，是 ［ ］ 常见的职业病，目前尚无有效的治疗药物 1 。胶原蛋白聚集是肺纤维化(Pulmonary Fibrosis， PF ）的重要标志，多数研究发现，在肺纤维化的发生发展过程中，不同时期肺组织的I 和Ⅲ ［ ］ 型胶原有不同变化 2 。本实验旨在通过不同的染色方法对大鼠肺组织的 I 、Ⅲ型胶原进行不 同时间、不同部位的动态观察，探讨中药益气活血法对肺纤维化大鼠I、Ⅲ型的影响。 1 材料与方法 1.1 材料 1.1.1 实验动物 选择 6 周龄雄性 SPF 级 Wistar 大鼠(湖北省医学科学院实验动物研究中心提供，合格证 号：SCXX(鄂）2003-0005)80 只，体重 170~200g。 1.1.2 实验用药 益气活血方(黄芪、虎杖、水蛭等），含复方生药 1.6g/ml(湖北省中医院药剂科提供，批 号 。实验前提取本品稀释成含复方生药0.4g/ml 浓度的药液。 1.1.3 实验试剂及仪器 博莱霉素 A5(天津太河制药有限公司产品，批号：040601，8mg/支）；苦味酸天狼猩红(福 建东旗生物技术公司生产，批号：050420) ；新天 XP-1 型偏光显微镜(贵州新天光学仪器研 究所，批号：010928) 。 1.2 方法 1.2.1 造模方法 动物适应实验环境 1 周，手术前 1d 大鼠颈部脱毛、备皮。手术中用 1%戊巴比妥钠 *本课题得到教育部博士点基金 (20070026025)的资助。 - 1 - (30mg/kg ）腹腔注射，将麻醉大鼠仰卧位固定在鼠台上，常规消毒皮肤、铺巾，取颈部正中 线作手术切口，切开皮肤，以血管钳钝性分离暴露气管，用 8 号头皮针将博莱霉素A5(7mg/kg ） 从气管软骨环间隙向心端刺入气管，迅速将鼠板直立旋转，使药物均匀分布在肺内，逐层缝 3 合肌肉、皮肤后，消毒。术后注射青霉素(80×10 u/d ，连续 3d ）预防感染。假手术组，除注 入气管的为氯化钠溶液外，其它同手术造模法。 1.2.2 分组及给药 将动物随机分成 4 组，每组大鼠 20 只。假手术组：灌服氯化钠溶液 10ml/kg·BW，1 次 /d ，第 1-28d；模型组：造模+灌服氯化钠溶液 10ml/kg·BW，1 次/d ，第 1-28d；益气活血组， 造模+灌服益气活血方 10ml/kg·BW，