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河南师大附中高中生物必修二课件——探索遗传物质的过程精要.ppt
五、DNA的粗提取和鉴定 实验原理 DNA在0.14mol/L NaCl 溶液中溶解度最低 DNA遇二苯胺试剂水浴 加热产生蓝色 (粗提取) (鉴定) 0.14mol/L NaCl浓度 DNA溶解度 五、DNA的粗提取和鉴定 实验过程 制备鸡血细胞液 提取血细胞核物质 (加柠檬酸钠防凝血) (加蒸馏水胀破细胞,纱布过滤取滤液) 溶解核DNA 析出DNA黏稠物 鉴定DNA (加2mol/L NaCl溶解DNA) (加蒸馏水稀释NaCl至0.14mol/L析出DNA) (加二苯胺试剂水浴加热鉴定DNA) 1-8 DDDBA DCA9.(1)31P,32P (2)32S,蛋白质不是遗传物质,35S,合成子代噬菌体蛋白质的原料是细菌体内的含有35S的氨基酸 (3)DNA是遗传物质,蛋白质不是遗传物质 * * * 第四章 第一节 探索遗传物质的过程 染色体中主要由DNA和蛋白质两种物质构成。 生物体的遗传物质是DNA还是蛋白质呢? 实验材料: 两种肺炎双球菌 多糖类荚膜 R型肺炎双球菌 S型肺炎双球菌 一.格里菲思的肺炎双球菌体内转化实验 菌落:由单个细菌细胞在培养基表面或内部生长繁殖到一定程度形成肉眼可见有一定形态结构等特征的子细胞的群落。 肺炎双球菌菌体 青霉菌菌落 光滑 粗糙 两种肺炎双球菌的菌落 两种肺炎双球菌的区别 特点 类型 菌落 荚膜 毒性 S型 光滑 有 使人患肺炎或 使小鼠患败血病 R型 粗糙 无 无 思考与讨论 实验是否符合实验设计的基本原则? 实验组和对照组分别是什么? 结果和结论分别是什么? 实验过程图解 R型活菌 小 鼠 注射 S型活菌 注射 S型死菌 注射 R型活菌 S型死菌 混合后注射 存活 死亡 存活 死亡 体内分离出活的R型菌和S型菌 ①加热杀死的S菌中含有某种“转化因子” 格里菲思实验的结论 ②这种“转化因子”可以将R菌转化为S菌 ③这种“转化因子”能够遗传 在杀死的S型细菌中含有哪些物质? 多糖 脂类 蛋白质 RNA DNA 加热杀死的S型细菌 但究竟哪一个才是转化因子呢? 在证明DNA还是蛋白质或其他物质是遗传物质的实验中最关键的设计思路是什么? 必须将蛋白质、其他物质与DNA分开,单独、直接地观察它们的作用,才能确定究竟谁是遗传物质。 分别与R型活细菌混合培养 多糖 脂类 蛋白质 RNA DNA DNA+DNA水解酶 加热杀死的S型细菌 R型 S型 R型 R型 R型 R型 R型 S型 R型 二.艾弗里的肺炎双球菌体外转化实验 DNA是使R型细菌产生稳定遗传变化的物质——转化因子,而蛋白质不是。 以上转化实验表明: DNA是遗传物质。 蛋白质不是遗传物质。 实验结论: T2噬菌体的遗传物质究竟是蛋白质还是DNA? 三.赫尔希和蔡司的噬菌体侵染细菌的实验 T2噬菌体中 60%是蛋白质, 40%是DNA. 蛋白质 外壳 DNA 背景资料: T2噬菌体是一种专门寄生在大肠杆菌体内的病毒,T2噬菌体侵染细菌后,就会在自身遗传物质的作用下,利用细菌体内的物质来合成自身的组成成分,从而进行大量的繁殖。 赫尔希和蔡斯的实验: 同位素标记法 蛋白质的组成元素: DNA的组成元素: C、H、O、N、S C、H、O、N、P (32P标记) (35S标记) 噬菌体 如何获取被放射性同位素标记的噬菌体? 病毒有高度的寄生性,完全依赖宿主细胞的物质、能量和代谢系统,获取生命活动所需的物质和能量,离开宿主细胞,它只是一个大化学分子,停止活动。 思考:能不能用放射性的培养基直接培养噬菌体? 背景资料: 放射性同位素标记噬菌体方法: 含35S的 培养基 培养 大肠杆菌 含35S的 大肠杆菌 蛋白质外壳含 35S的噬菌体 含32P的 培养基 培养 大肠杆菌 含32P的 大肠杆菌 培养 噬菌体 DNA含 32P的噬菌体 培养 噬菌体 三.T2噬菌体侵染细菌的实验 第一组 蛋白质: DNA: 噬菌体 35S 31P 第二组 蛋白质: DNA: 噬菌体 32S 32P 蛋白质: DNA: 大肠杆菌 32S 31P 蛋白质: DNA: 大肠杆菌 32S 31P 实验材料 放射性 放射性 三、T2噬菌体侵染细菌的实验 实验结果 第一组 第二组 亲代 噬菌体 35S的 蛋白质 32P的 DNA 侵染后宿主细胞内 无35S的 蛋白质 有32P的 DNA 子代 噬菌体 蛋白质外壳中无35S DNA有32P 实验结论 亲代噬菌体DNA进入大肠杆菌,指导子代噬菌体的的合成和组装 在噬菌体中,亲代和子代之间具有连续性的物质是DNA,而不是蛋白质。 也就是
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