溶血性贫血的实验室检查精要.ppt

【参考值】正常人直接、间接均抗人球蛋白试验均阴性 【临床意义】 1）阳性见于AIHA， 新生儿溶血病，SLE等 2） AIHA大多为IgG （温抗体型 37℃条件下作用最强 ），少数为IgM (冷抗体型 4℃条件下进行试验) 3）间接试验主要见于Rh或ABO妊娠免疫性新生儿溶血病母体血清中不完全抗体检测。 【原理】机体存在抗自身红细胞抗体，在低温时与相应抗原结合，使红细胞凝集，特别是在4℃时最强烈，但温度升高到37 ℃后凝集消失，称为冷凝集试验。 【参考值】效价1：40 【临床意义】某些AIHA，传染性单核细胞增多症、恶性淋巴瘤等可阳性。动态检测，凝集效价增高4倍以上较有诊断价值。 一种后天获得性血细胞膜缺陷的克隆性疾病，临床上可表现血管内溶血、栓塞、全血细胞减少等，有时可出现骨髓衰竭。 大多数PNH患者异常克隆与正常造血并存，使本病的诊断和发病机制的研究受到限制。 PNH患者红细胞膜表面缺乏加速衰变因子（DAF，CD55）反应性溶血的膜抑制物（MIRL，CD59）等，使红细胞对补体敏感而溶血。 上述3种蛋白都经糖基化磷脂酰肌醇(GPI)连接在细胞膜上，称为GPI锚连蛋白。 GPI锚连蛋白缺失是由于体细胞发生X连锁的PIG-A基因突变造成的。 【原理】膜蛋白缺陷的红细胞对补体敏感增加，在弱酸血清（pH6.6~6.8）中，经37℃ 孵育后红细胞发生溶血。 【临床意义】正常人阴性，阳性见于阵发性睡眠性血红蛋白尿（PNH）。该法敏感性较高。特异性高。 Ham试验 【原理】 蔗糖离子浓度低，增强补体与红细胞结合，使红细胞膜上形成小孔，蔗糖进入红细胞而致溶血。 【临床意义】正常阴性。PNH本试验常为阳性。可作为PNH筛选试验，阴性可排除，阳性应作Ham 试验。 【原理】 蛇毒因子是种溶血因子，能直接激活补体C3，激活补体系统，造成溶血。 【参考值】 溶血度5% 【临床意义】 阳性提示PNH。 【原理】CD55，CD59是补体调节蛋白，具有GPI锚定蛋白作用。PNH患者红细胞和粒细胞上GPI锚缺陷，无法结合在细胞膜上，导致对补体敏感，容易发生溶血。 【参考范围】 外周血中CD55，CD59阴性红细胞和中性粒细胞均5％ 【临床意义】PNH患者该类细胞10％ 1.初筛试验 血管内溶血的特点： 血浆游离血红蛋白增高，结合珠蛋白(Hp)降低，血红蛋白尿及尿中出现含铁血黄素等 2.诊断试验 酸化血清溶血试验(Ham’s试验)、蔗糖溶血试验、蛇毒因子溶血试验等 3.特异的诊断PNH的实验方法 CD55和CD59检测：用双色荧光流式细胞术检测PNH患者红细胞膜上的CD55和CD59，当PNH患者的CD59阴性细胞占3％以上时即可检出 1.是否为溶血性贫血 2.区分溶血部位 3.溶血原因诊断 Coombs’ 试验、酸溶血试验、渗透脆性试验等的临床意义 哪些实验室检查主要提示血管内溶血？ 各种原因导致红细胞生存时间缩短、破坏增多或加速，骨髓代偿造血功能不足时所发生的一类贫血叫溶血性贫血。 指骨髓代偿能力足以补偿红细胞的损耗而不出现贫血时称溶血性疾患。 按发病机制分类 1. RBC内在因素（遗传性/获得性） RBC膜缺陷：遗传球、PNH RBC酶缺陷：G-6PD缺乏症 珠蛋白异常（肽链不平衡）：海洋性贫血、异常血红蛋白病 2. RBC外在因素（获得性） 免疫性溶贫: AIHA 、新生儿溶血症、药物诱发红细胞相关抗体 机械损伤性：DIC 、 TTP、人造瓣膜 感染：疟疾 物理因素：灼伤 毒素：蛇毒 脾亢: 单核巨噬细胞功能亢进 按溶血发生部位分类（RBC破坏场所） 血管内溶血：RBC在血管内破坏 见于DIC、机械性微血管病变、烧伤、输血、PNH 血管外溶血：RBC在单核-吞噬细胞系统吞噬或破坏 AIHA，遗传性球形细胞增多症 RBC寿命测定 51Cr同位素标记 参考值：25~32天 半衰期15天，说明有溶血存在 1.血浆游离血红蛋白 (plasma free hemoglobin,FHb) Hb 破坏 血浆Hb 游离Hb 结合珠蛋白 参考值: 40mg/L 血管内溶血: PNH 蚕豆病 血管内 溶血性贫血的筛选检查 血清结合珠蛋白 结合 运输 血管内FHb 肝实质细胞清除 各种溶血(血管内和血管外) 都明显下降 (肝合成的a2-糖蛋白) 临床意义 【参考值】：0.7～1.5 g/L 【临床意义】： Hp减少，提示溶血存在，血管内溶血时显著减低 Hp增加，提示急慢性感染、恶性肿瘤、创伤、风湿性关节炎、SLE等 3.尿含铁血黄素(Rous te