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1-磷酸-鞘氨信号在小鼠感觉神经节发育中作用的研究
·中文论著摘要·
卜磷酸一鞘氨醇信号在小鼠感觉神经节发
育中作用的研究
刖 吾
卜磷酸一鞘氨醇(Sphingosine1-PhosphateSIP)是一种具有重要生物学活
性的溶血磷脂,是一个在细胞生存,生长,分化,迁移等多个生物学过程中起到
示Sphkl在肿瘤发生发展中的具有重要作用。已知Cer,Sph与S1P的作用相反,
SIP能够促进细胞的增殖,抑制细胞的凋亡,而Cer,Sph则抑制细胞的增殖,促
进细胞的凋亡。Cer,Sph与SIP的代谢在肿瘤中通常是异常的。SIP一方面通过
自分泌与旁分泌的方式与G一蛋白偶联的SIP受体1-5结合,另一方面通过细胞内
第二信使途径而调节细胞的上述功能。神经脊细胞是一种多能性胚胎干细胞,是
包括感觉神经节在内的多种组织的起源细胞。感觉神经节包括脊神经节及脑神经
节,它们将痛觉,机械刺激,本体感觉从周围靶点传递到高级躯体感觉中枢。对
于神经脊细胞迁移到固定地点并开始增殖分化成感觉神经元及神经胶质细胞的基
因调控机制至今还知之甚少。为了筛选与感觉神经节发生相关的候选基因,通过
eDNA宏阵列对比迁移早期的神经脊细胞与迁移晚期开始增殖分化的神经脊细胞的
基因差异性表达,我们发现了一系列涉及不同基因路径的基因在神经脊细胞停止
SIP信号在胚胎感觉神经节的发育中应该具有一定的作用。
研究目的
的表达,特别是在神经系统发育过程中的表达,以确定它们表达的具体部位和所
别是感觉神经节发生中的作用,并进一步明确SIP在感觉神经节发育中的作用途
径。
材料与方法
l、通过整体胚胎、组织切片原位杂交及免疫荧光的方法检测SphKI,SphK2,
SIP受体I-5在野生小鼠胚胎发育过程中的表达。
低限度,以探讨SIP在胚胎发育特别是感觉神经节发生中的作用。
结 果
细胞中特异性表达,并且随着胚胎的发育,部分神经细胞也开始表达Sphkl。Sphk2
在同阶段的感觉神经节中则无明显表达。
2、Sphkl和Sphk2基因敲除结果显示单独敲除它们中的任何一个基因,小鼠
寿命正常,主要器官的组织学分析没有发现与野生型有明显差异。说明Sphkl和
Sphk2之间的功能是互补的。为了把SIP水平控制在极低或零的水平,进一步联
能存活超过E12.5天。在EIO.5天和E11.5天发现不同程度的感觉神经节发育缺
陷。脊神经节和三叉神经节较小,神经元形态不整,排列紊乱。用免疫荧光标记
SOXIO阳性的神经前体细胞,Isletl/2阳性的已分化的神经细胞,
叉神经节和脊神经节内的神经前体细胞及神经细胞数量显著性减少,细胞数的减
少是由于凋亡细胞增加,增殖细胞减少而导致的。神经前体细胞和神经细胞都经
历细胞凋亡的过程。在Sphkl和Sphk2基因联合敲除小鼠的SIP接近于0的同时,
2
值成千倍的增高。可见Cer,Sph与SIP的比例严重失衡,导致细胞凋亡凸显。
是发育晚期的神经上皮和/或神经节内细胞都有一定程度的表达。Slpr3主要表达
于围绕神经结构的非神经组织。没有发现SIP五种受体中的任何一种在感觉神经
节发育的早期有特异性的表达。
结论
1、Sphkl在脊神经节和三叉神经节早期发育过程中的神经前体细胞和神经细
胞特异性表达。
2、SIP缺失导致小鼠的感觉神经节的发育缺陷,其作用是通过促进感觉神经
节内神经前体细胞和神经细胞凋亡,并且抑制神经前体细胞增殖而实现的。
3、S1P在感觉神经节发育中的作用是通过细胞内第二信使,而不是细胞表面
受体的途径而实现的。
关键词
卜磷酸一鞘氨醇,卜磷酸一鞘氨醇受体,鞘氨醇激酶l,鞘氨醇激酶2,感觉神
经节,基因敲除,原位杂交,免疫荧光
3
·英文论著摘要·
RoleofSIP inMouse
The Signaling Sensory
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