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BMP7-Ids信号通路对大肠癌侵袭性和增殖性变化的实验研究…………………………………………中文摘要 BMP7-Ids信号通路对大肠癌侵袭性和增殖性变化的实验研究 中文摘要 大肠癌正成为人类发病率最高的恶性肿瘤之一，而从分子生物学层面探讨大 肠肿瘤发生、发展的机制是目前研究的热点。BMP7一Ids信号通路在恶性肿瘤中 的作用近年来正逐步得到关注，但很多问题未得到阐明。 本实验以BMP7因子作为研究中心，首先检测在临床大肠癌组织标本中BMP7、 它的I型受体ALK2、它的下游分子Id2和Id3的mRNA和蛋白的表达，探讨其与 临床因素的相关性，它们之间的关系；随后通过在大肠癌细胞株中添加不同浓度 的BMP7因子，观察细胞侵袭性和增殖性的变化，相关周期蛋白表达的变化；最 后，通过基因干扰，将BMP7基因下游的两个因子Id2和Id3沉默，探讨在BMP7 因子促进侵袭性和增殖性的过程中，Id2和Id3所起的作用。 第一部分 BMP7一Ids信号通路相关分子在大肠癌中的表达及临床意义 目的 探讨临床大肠癌组织标本中BMP7、它的I型受体ALK2、它的下游基因Id2 和Id3的mRNA和蛋白的表达，与临床因素的关系，它们相互之间的关系；并检 测相关大肠癌细胞株BMP7蛋白的表达。 方法 临床收集60例大肠癌组织和癌旁正常组织标本，并去病理科收集这些病人 PCR和免疫组化方法分别检测这些标本中 的石蜡切片标本。采用Real-Time 结果 达与肿瘤浸润深度、是否有淋巴结转移和肝转移以及Duke分期明显相关，BMP7 的蛋白表达与mRNA表达明显相关；大肠癌组织中ALK2的mRNA和蛋白表达明显 高于正常组织，ALK2的蛋白表达与mRNA表达明显相关；大肠癌组织中的Id2的 mRNA和蛋白表达明显高于正常组织，Id2的mRNA表达与肿瘤浸润深度和是否有 肝转移明显相关，Id2的蛋白表达与mRNA表达明显相关；大肠癌组织中Id3的 BMPT-Ids信号通路对大肠癌侵袭性和增殖性变化的实验研究…………………………………………中文摘要 mRNA和蛋白表达与正常组织相比无明显差异；大肠癌组织中Id2的mRNA表达与 子，SW480细胞的BMP7因子表达量很微弱。 结论 BMP7 mRNA在大肠癌组织中明显表达，且与肿瘤浸润深度、淋巴结和肝转移 以及Duke分期明显相关；Id2mRNA在大肠癌组织中明显表达，且与肿瘤浸润深 蛋白表达在肿瘤中明显升高，并且均与mRNA表达明显相关。Id3在肿瘤中的mRNA 和蛋白表达均无增高。 关键词：BMP7：ALK2；Id2：Id3；大肠癌 第二部分 BMP7因子对大肠癌细胞增殖性及侵袭性的影响 I|的 探讨BMP7因子对大肠癌细胞株侵袭性和增殖性的影响，对相关细胞周期依 赖性蛋白激酶及其抑制剂表达的影响，以及对其下游Id2和Id3因子表达的影响。 ：亨法 通过在大肠癌细胞株HT29中添加不同浓度的BMP7因子，并和对照组比较， 用细胞侵袭实验、MTT实验、流式细胞检测和WesternBlot实验观察细胞侵袭 性和增殖性的变化，检测相关细胞周期依赖性蛋白激酶及其抑制剂的表达变化以 及下游的Id2和Id3因子表达的变化。 结果 BMP7因子可以以浓度依赖性的方式增加大肠癌细胞株侵袭性和增殖性，并 D1和周期依赖性蛋白激酶CDK4蛋白的表达，抑制细胞 诱导细胞周期素Cyclin 周期依赖性蛋白激酶抑制剂P21蛋白的表达：此外，BMP7因子还可诱导其下游 Id2和Id3因子的表达，并以Id2因子的诱导更为显著。 结论 BMP7可增加大肠癌细胞的侵袭性和增殖性，而这一作用可能与细胞周期素 inD1和周期依赖性蛋白激酶CDK4蛋白的表达的增加和细胞周期负性调控 Cycl l园子P21蛋白的表达的减弱有关；BMP7因子还可诱导其下游Id2和Id3因子的 表达，并以Id2因子的诱导更为显著。 l帅7-Ids信号通路对大肠癌侵袭性和增殖性变化的实验研究…………………………………………中文摘要 关键词：侵袭性；增殖性；细胞周期 第三部分