cpg odn非小细胞肺癌放射增敏作用的实验研究.pdf

中文摘要 据世界卫生组织统计全球每年肺癌新发病例超过120万，每年因肺癌而死亡 的人高达约110万，已经成为第一癌症杀手。非小细胞肺癌(NSCLC)占全部肺 癌的85％以上。放疗在NSCLC综合治疗中占据了重要地位，但癌细胞自身对放射 线的抗拒性往往导致放疗失败，寻找行之有效的放射增敏剂是多年来肺癌研究领 域倍受关注的热点。既往研究证实，含有非甲基化CpG-核苷酸的寡聚脱氧核苷 ODN ODN)可激活机体免疫系统，从而增 酸(CpGoligodeoxynucleotide，CpG ODN可直接诱导癌细胞凋亡， 强多种抗癌措施的疗效；但近年的文献报道，CpG 抑制癌细胞生长，并对NSCLC和前列腺癌有化疗增敏作用。诱导细胞凋亡是肿 瘤治疗的关键，对放疗敏感的癌细胞较不敏感细胞更易进入放射线诱导的细胞凋 亡过程。而目前CPG ODN是否能增强人NSCLC细胞放射敏感性尚未见报道。 ODN对人NSCLC放射增敏作用及其 在本研究的第一部分，为了探索CpG 可能作用机理，我们以人肺腺癌A549细胞株为观察对象，首先用MTS法检测 ODN7909(5，10，30，60 h、48 不同浓度CpG rtg／m1)分别作用24h后，对 ODN7909可直接抑制A549细胞活力， A549细胞活力的影响。结果表明，CpG 并呈剂量和时间的依赖性。随后将A549细胞随机分为四组：空白对照组、CpG ODN7909+照射组。并用克隆集落形成法检测各组 0DN7909组、照射组、CpG 细胞增殖情况；流式细胞仪检测细胞凋亡情况及细胞周期分布；ELISA法检测细 ODN7909(10 胞培养液中肿瘤坏死因子(TNF．仅)的浓度。结果表明，CpG t．tg／m1) 联合照射组与空白对照组相比，细胞克隆存活分数降低、细胞凋亡率明显增高、 ODN7909 细胞TLI@的mRNA的表达。结果表明，A549细胞表达TLR9，但CpG 是否通过A549细胞内TLR9信号途径起放射增敏作用，还有待于进一步的研究。 ODN7909(10 因此，我们认为CpG lxg／m1)能有效提高A549细胞放射敏感性， ODN7909联合放疗治疗习IEd,细胞肺癌提供了实验依据。 为今后临床上使用CpG 本课题组在之前体内试验中发现，CPGODNl826(每只小鼠腹腔注射O．3 mg)可通过增强小鼠免疫功能来提高C57BL／6小鼠Lewis肺癌移植瘤放射敏感 性。为进一步探索CPGODNl 826对C57BL／6小鼠Lewis肺癌移植瘤放射增敏作 用的剂量效应，本研究第二部分，我们以Lewis肺癌移植瘤模型为对象，首先将 成功建立Lewis肺癌移植瘤模型随机分为6组，每组8只：对照组(腹腔注射PBS 液)、X线照射组(单纯给予分次照射：250cGY／fj(，共1250 ODN cGY／5fx)、CpG ODNl826，注射时间为第1，2，9天，共0．3 组(每只小鼠腹腔注射CpG mg) ODNl826 及低、中、高剂量CpGODN联合X线照射组(每只小鼠腹腔注射