e-钙粘附素β连环素复合体对孕鼠神经干细胞迁移和归巢的影响.pdf

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e-钙粘附素β连环素复合体对孕鼠神经干细胞迁移和归巢的影响

摘要 摘要 cordin 脊髓损伤(Spinaljury,SCI)为中枢神经系统的严重创伤,是造成瘫 痪的主要病因。传统观点认为,SCI是不可修复和再生的,近年来大量研究发现 stem 神经干细胞(Neuralcells,NSCs)具有多向分化潜能,在特定的环境中对 神经系统缺血、损伤、变性等原因造成的功能障碍有明显的修复作用。脊髓损 伤后再生能力受限主要是因为缺乏诱导、促进神经再生的微环境,而非损伤的 轴突本身不具有再生能力。本实验就是研究一些细胞因子,主要是一些粘附分 子(adhesionmolecules,AM)对NSCs迁移和归巢的影响。 的时候相互依存,所以经常把它们放在一起研究。E.cad属于钙粘素家族中一 员,广泛存在于各类上皮细胞中,是一种钙依赖性粘附分子,主要介导同型细 胞间的粘附反应,并起细胞骨架作用,维持组织结构的完整性和上皮极性。cat 是一组具有相似结构的胞内糖蛋白家族,分为4大类,即a.cat、B.eat、丫. 附,处在E?cad/cat复合体的核心位置,因而可能是E.cad功能的调节位点。 本实验采用实时定量PCR测定孕鼠神经干细胞中E—cad和D—cat在神经干细 胞原代和传代4—6代后的含量变化,并结合流式细胞技术测量p—cat相应的变 化,从而判断粘附分子对神经干细胞的传代有何影响。 目的:本课题采用RT-PCR测量神经干细胞在原代和传代4.6代后E.cad和 B.cat的表达量是否有所变化,同时在蛋白表达水平借助流式细胞技术测量B—cat 相应的表达变化,进而判断这两种粘附分子在神经干细胞的传代过程中有何影 响,为以后神经干细胞的迁移、植入的研究打下基础。 方法:孕鼠神经干细胞若干,先进行Ncstin染色,证明神经干细胞未分化, 量检测,剩余的继续培养,保持传代不分化,传代4-6代,即2周左右,再一次 重复前面的操作,统计前后的结果有无差别。 明显增多,且差别具有统计学意义(P0.05);相应的流式细胞技术测量B_cat 的含量变化,我们发现p—cat的含量也明显增多,且差别同样具有统计学意义 摘要 (PO.01)。 结论:粘附分子E—cad和P_cat在神经干细胞的传代过程中含量发生明显 变化,我们推测它们在神经干细胞原代的保持中起到一定的作用。 关键词:E-cad、P—cat、E-cad/cat复合体、神经干细胞、传代。 Ⅱ ABSTRACT central cord isseveretraumaofthe nelvous Spinalinjury(SO),which system,is a oause viewisthatSCIcannotbe and major ofparalysis.Traditional repaired in recent a numberofstudiesfoundthatneulalstemcells regenerated.Butyearslarge with differentiationa aclearrole multiple potential,inparticularenvironment,make onthenervous andothercaus鹤of systemischcmia,injury,degenerationdysfunction in afIer cord islimited the

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