ω-3不饱和脂酸对视网膜新生血管作用的实验研究.pdf

ω-3 不饱和脂肪酸对视网膜新生血管作用的实验研究 硕 士 研 究 生: 顾晓宇 指 导 教 师：任兵教授 专 业 名 称： 眼科学 摘 要 目的：研究ω-3 不饱和脂肪酸对鼠视网膜新生血管的作用。 方法：选取出生后7 日健康清洁级新生Wistar 白鼠32 只，雌雄不限，分为 A 、B 、C、D4 组，每组各8 只，分别与母鼠共同饲养， 四组实验鼠在空气中喂 养5 日后将12 日龄鼠与母鼠取出，均置于氧气含量为75%±2%的密闭孵育箱中， 每天将母鼠取出1 次，每次正常环境中饲养3 小时， 5 日后将12 日龄小鼠取出， 放置空气中喂养至17 日龄，即制备出新生鼠早产儿视网膜病变动物模型。其中 A 组为ROP 模型对照组，B 、C、D 组分别小剂量治疗组、中剂量治疗组及大剂 量治疗组，分别给予不同剂量ω-3PUFAs 喂养，按母鼠公斤体重给与ω-3PUFAs 2.5mg/kg/d 、7.5mg/kg/d 及15mg/kg/d 喂养。手术显微镜下摘除小鼠视网膜，采 用免疫组化观察小鼠中突破视网膜内界膜CD31 的特异性表达，Western 印迹法 检测视网膜标本中RGS5 的表达。 结果：免疫组化观察各组样本鼠新生血管内皮细胞核突破视网膜内界膜数， A 组突破视网膜内界膜的新生血管内皮细胞核数为( 17.00±3.42 ）个、B 组突破视 网膜内界膜的新生血管内皮细胞核数为（15.63±2.67）个、C 组突破视网膜内界 膜的新生血管内皮细胞核数为（9.13±1.96 ）个、D 组突破视网膜内界膜的新生血 管内皮细胞核数为（8.38±2.19 ）个；其中模型组突破视网膜内界膜的新生血管内 皮细胞核数高于ω-3PUFAs 喂养组，小剂量ω-3PUFAs 喂养组突破视网膜内界膜 的新生血管内皮细胞核数高于大剂量ω-3PUFAs 喂养组。A 组与C 组、A 组与D 组比较差异均有显著意义（(P0 ．001) ，其中A 、B 组相比较；C、D 组相比较 差异无显著意义（P0.05 ）。 免疫印迹法检测各实验组视网膜RGS5 的表达：A 组RGS5/β-Actin 值为 ( 0.24±0.96 ）、 B 组RGS5/β-Actin 值为（0.36±0.08 ）、C 组RGS5/β-Actin 值为 （0.51±0.23 ）、D 组RGS5/β-Actin 值为（0.66±0.19 ）。其中模型组RGS5/β-Actin 值低于ω-3PUFAs 喂养组，小剂量RGS5/β-Actin 值低于中剂量ω-3PUFAs 喂养 组，中剂量ω-3PUFAs 喂养组略低于高剂量ω-3PUFAs 喂养组，A 组与C 组、A 组与D 组比较差异均有显著意义（(P0 ．001) ，其中A 、B 组相比较；C、D 组 相比较差异无显著意义（P0.05 ）。 结论： RGS5 表达并介导鼠视网膜新生血管疾病的病理过程,方差分析显示 给予一定剂量的ω-3 不饱和脂肪酸对于RGS5 有调节作用,并参与对视网膜新生 血管的调节。 关键词：ω-3 不饱和脂肪酸； 视网膜； 新生血管 I Abstract Object: T0 explore the effect of ω-3 PUFAs on the retinal neovascularrization ． Methods: Thirty two 7 days old clearing Wistar pups with 4 mother mice were randomly divided into four groups to make Retinopathy of Premature (ROP) model:control group(A),low dose experimental group(B) 、middle dose experimental group(C) and high dose experimental group(D), each group was with a mother mice ,