中药寒热性代谢学判别模式的建立研究.pdf

中药寒热药性代谢组学 判别模式的建立研究 中文摘要 目的： 中药药性理论是传统中医药学的核心内容，其中寒热药性更是占据其主导 地位。传统的中药药性理论多源于经验，目前的中药现代化的研究多基于在西 药学植物化学及天然药物化学理论指导下的单体成分研究，而较少涉及以中医 药学自身思维特点为基础，从药性方面入手进行系统研究。代谢组学作为系统 生物学的新兴学科，其借助代谢组学技术整体系统的研究方式与中医药学传统 理论相符合。本研究拟根据传统中药的四气分类，选取寒热药性为研究代表， 探索寒热不同药性的中药作用于生物体内引起的代谢产物的变化。根据这些变 化，寻找药物寒热药性与代谢产物变化的关系，在此基础上筛选出具有寒热药 性的特征性的候选代谢产物，并建立可用于鉴定中药寒热药性的特征性的判别 模式，为中药药性判定提供确切的分子理论基础，并可用于中药学新药的丌发 及药性鉴定，对于中药现代化研究的思维模式转变具有一定的促进作用，为中 西医结合用药提供更为可靠的理论依据。 材料与方法： 1．中药给药前后大鼠血清采集：选取19味中药单药颗粒，根据药物四气分为热、 寒两组，寒性药物组含10味药材，热性药物组含9味药材，同时设立溶剂对照 组及窄白对照组。将SD大鼠在相同条件下饲养6天后行眼眶静脉丛取血，收集 血清，作为给药前对照样本。取血后给予单药灌胃7天，每F=I1次，给药量为人 体常用剂量／人标准体重*20，剂量为2ml／R，j灭。于第7-天给药后两4,H,J再次日艮 眶静脉丛取血，收集血清。 2．代谢组学分析：将给药前后的血清经过除蛋白、冻干等预处理之后，进行基 于HPLC—TOFMS(高效液相色谱一飞行时I、白J质谱)的血清全组分代谢组学分析。 3．将原始数据经过R统计软件，进行L检验及l’l，}DA分析判别，得到各种代谢 物的相关信息，建立基于中药寒热药性的代谢组学判别模型。 复口．人学坝l‘学位论_!：c： 4．以t检验P值小于0．05为标准，确定不同组问比较所得差异代谢物化合物。 结果： 1．通过ItPLC—TOF／MS检测，可以有效并且系统检测出中药对于机体4-(N层面的改 变。 2．通过}IPLC—TOF／MS检测，可检测出寒热不同药性药物引起机体的代谢改变。其 中得到热性药物特异性改变代谢物41种，寒性药物特异性改变代谢物30种。 3．通过PLS-DA方法可初步建立区分寒热药性差异的判别模型，该模型可解释 85．3％分类信息，模型预测能力为61．8％。 结论： 1．通过高效液相色谱一飞行时I’白J质谱联用技术可以系统并且全面的检测出中药 作用于机体引起的代谢层面的改变。 2．寒性药物和热性药物作用于机体都存在特异性代谢差异化合物，并且这些差 异化合物可通过代谢组学技术筛选，得到候选潜在的标志性差异化合物。 3．寒热不同药性对于机体代谢层面改变明显，通过偏最小二：乘判别模式可建立 中药寒热药性的判别模型。 关键词：中药药性，寒热药性，代谢组学，中药现代化研究，高效液相色谱一飞 行H,-J-fuj质普联用技术 中图分类号R71妇产科学 复口人学颂Jj学位论义 ——————————————————————————————————————————一 Di scriminant Modelfor theCold andHot Property ofTraditional ChineseMedicine byHPLC．——TOFMS Abstract Object： Chinese herbalmedicine iS themaincontent theory