人工发酵虫草菌体干粉对实验性糖尿病大鼠肾脏保护作用的研究.pdf

中文摘要 人工发酵虫草菌丝体干粉对实验性糖尿病大鼠肾脏 保护作用的研究 摘 要 目的：糖尿病肾病(diabetic 病(diabetesmellitus，DM)患者最重要的微血管并发症之一。 近年来随着糖尿病发病人数的增加，糖尿病肾病的发病率呈 逐年上升趋势。冬虫夏草为麦角菌科真菌冬虫夏草Cordyceps 幼虫尸体的复合体，是一种富含多糖、氨基酸、脂肪酸、甘 露醇及多种微量元素的名贵中药材。传统医学认为冬虫夏草 味甘、性温，归肺、肾经，有补虚损，益精气，补肺益肾 等功效。糖尿病肾病以肾小球基底膜增厚、系膜扩张以及细 胞外基质(Extracellular 致肾小球的高滤过和蛋白尿，是引起终末期肾衰的重要原 因。多种细胞因子在DN发生机制各中间环节起重要作用。 色素上皮衍生因子(PEDF)是目前已知的抑制功能最强的 新生血管生成抑制因子，血管内皮生长因子(VEGF)是目前 所知的最强的促血管生长因子，具有增加血管通透性及促血 管内皮增生作用。PEDF与VEGF等细胞因子一起调节血管 的通透性及新生血管的发生。转化生长因子131(TGF一131) 能够刺激ECM合成，促进新生血管形成，从而导致DN发 生。多种细胞因子通过TGF．131发挥其作用。本研究通过腹 1diabetes (type 中文摘要 酵虫草菌丝体干粉(冬虫夏草代用品)进行干预治疗。运用 病理形态学、分子生物学等方法检测肾脏组织中PEDF、 可能关系以及人工发酵虫草菌丝体干粉的肾脏保护作用机 理。 方法：从48只8周龄SD大鼠中随机抽取12只作为正 常对照组(A组)，其余作为实验组。将实验组大鼠给予STZ 6．7mmol／L， 55mg／kg腹腔注射，72小时后测尾尖血糖大于1 持续3天，确认为T。DM动物模型。把DM大鼠随机分为 DM对照组(B组)、人工发酵虫草菌丝体干粉干预治疗组： 16周末测量大鼠体重，测定血糖(BG)、血中总胆固醇(TC)、 excretion albumin 股动脉放血处死动物，酶联免疫分析法(ELISA)测定血清 PEDF和VEGF的浓度。以肾组织制备光镜切片，进行形态 件处理实验数据，各组数据比较前先进行方差齐性检验，符 合方差齐性的数据多组比较采用方差分析(ANOVA)，组间 比较采用LSD检验，方差不齐的数据采用非参数检验。相关 分析采用直线相关。 结果： 1实验第4周末检测指标：B组、C组和D组大鼠体重 中文摘要 的含量测定：B组PEDF含量较A组明显降低且差异具有显 组且差异具有显著性(均P0．01)。 4HE染色结果显示：B组大鼠肾小球面积增大，系膜基 质显著增生，肾小球基底膜及囊壁增厚。肾小管出现细胞空 泡变性，管腔变窄。 5免疫组化结果显示：A组肾组织PEDF表达较B组明 显增加，体现在阳性染色的积分光密度值(IOD)及阳性面 在肾小球、肾远曲小管、髓袢和近曲小管上；而C组、D组 值均O．01)，其阳性染色主要分布在肾小球基底膜、肾小管 和肾间质；而C组、D组的VEGF表达强度则介于B组和A 组之间。相关分析表明PEDF与VEGF表达水平呈显著负相 关(严．0．649，p0．01)。 中文摘要 6 且差异具有显著性(均P0．01)，但较A组降低且差异具有 显著性(均P0．01)。 7 低且差异具有显著性(均P0．01)，但较A组升高且差异具 有显著性(均P0．01)。 结论： l正常大鼠肾脏PEDF蛋白表达明显升高；DM大鼠肾 的表达改变与DN发生密切相关。 2人工发酵虫草菌丝体干粉可能通过调节PEDF和 VEGF的蛋白表达，抑制新生血管形成，发挥其对肾脏的保 护作用。 3人工发酵虫草菌丝体干粉还可能通过调节血脂，降低 血糖，减少尿白蛋白排泄，改善全身代谢以及增强免疫力等 途径来发挥其在DN中的保护作用。 关键词：糖尿病肾病；人工发酵虫草菌丝体干