内源性干细胞动治疗大鼠脑梗死时间窗的实验研究.pdf

目 录 中文摘要……………………………………………………………………1 英文摘要……………………………………………………………………5 研究论文内源性干细胞动员治疗大鼠脑梗死时间窗的实验研究 前言……···…·········……………………·…··…···…………………lO刚舌”“““”“”一”“”””…“”……一“”“一““”～…”“”一“”“”一lU 材料与方法……………………………………………………………11 结果…····…····…-············…····…·········…····…··．．···············16 附图、附表……………………………………………………………21 讨论··········……·…··…·········…················……····…··…··…··75 参考文献………………………………………………………………80 综述内源性干细胞动员治疗脑梗死的研究进展………………………83 致谢·····…········……······…··…···············…······························92 个人简历……………………………………………………………………93 中文摘要 内源性千细胞动员治疗大鼠脑梗死时间窗的实验研究 摘 要 目的：目前应用干细胞治疗脑缺血的实验研究已经取得了初步成果， human 业已经证明重组人粒细胞集落刺激因子(recombinant colony．stimulating 迁移至神经系统分化为神经细胞。但以往的动物实验多是在脑梗死即刻给 予rhG．CSF进行疗效观察，而脑梗死患者就诊时间不同，不同时间窗给药 是否会影响治疗效果尚无实验研究。本实验是在大鼠大脑中动脉栓塞 cerebral (middle artery 予实验组大鼠皮下注射rhG．CSF，动态观察大鼠神经功能恢复情况，比较 不同时间窗给予rhG．CSF对脑梗死的治疗效果，探讨临床最佳的治疗时 状态的干细胞，观察骨髓干细胞的迁移、分化，并进行细胞计数、梗死体 积测量和检测凋亡相关因子探讨rhG．CSF改善脑梗死预后的可能机制。 方法： 鼠大脑中动脉脑栓塞模型，将模型制作成功的大鼠随机分为24小时、72 小时、7天3个给药时间点组，每个时间点组又随机分为实验组和对照组， 实验组、对照组分别为B组和b组，7天给药实验组、对照组分别为C组 10ug／Kg／天皮下注射，连续应用5天，同时给予Brdu50mg／kg／天腹腔注 射，连续应用至取材日。对照组颈部皮下注射等量生理盐水，Brdu 50mg／kg 腹腔注射，连续应用至取材日。每组分别于给药后5天、14天、21天取 大鼠脑组织。5天取材经检测CD34+抗原免疫组化了解内源性动员后骨髓 干细胞的动员情况，经bcl．2／bax抗原免疫组化了解神经细胞凋亡情况。 了解干细胞分化情况，经bcl．2／bax抗原免疫组化了解神经细胞凋亡情况。 每组于给药后 2l 天取材经氯化三苯基四氮唑 中文摘要 Severity Scores，NSS)了解大鼠神经功能情况。 2统计学分析：应用SASV8进行统计分析，所有统计结果均以均数±标 准差(x±s)表示。多样本均数比较采用完全随机方差分析，两样本比较采 用两样本均数比较的t检验。死亡率采用多个样本率比较的f检验。按 a=0．05作为检验水准，对资料进行统计分析。 结果： 1死亡率： 显著性差矍JJJ(PO．05)。 1．2给药后死亡率：A组死亡率4％，a组死亡率8％，二者无显著性差别 矍JIJ(PO．05)，a组、b组、c组无显著性差SwJ(PO．05)。 2神经功能缺损评分： 2．15天、14天、2l