内皮脂酶单基因态性与冠心病的关联研究.pdf

摘要 研究背景 冠心病是由遗传和环境等多种因素导致冠状动脉粥样硬化(AS)而使血 管腔狭窄阻塞导致心肌缺血缺氧或坏死而引起的一种心脏疾病，其致死率高 且发病率呈逐年上升趋势。目前的相关研究表明，血浆中较低的高密度脂蛋 平可以降低发生CAD的风险。血浆中的HDL．C浓度不但受到环境因素影响， 而且具有高度的遗传性。而目前的遗传学研究提示，HDL．C的遗传异质性与 调节HDL代谢的内皮脂酶(LIPG)的基因多态性有关。因此，本研究采用 病例．对照的方法，对内皮脂酶基因的单核苷酸多态性(SNP)与冠心病进行 群体关联分析，来探索冠心病的易感基因，对于开展有针对性地人群预防， 延缓和防止冠心病的发生发展有重要意义。 内皮脂酶(Endothelial lipase，EL)作为甘油三酯脂酶家族的成员，与脂 蛋白脂酶(Lipoprotein lipase，LPL)、肝脂酶(Hepaticlipase，HL)具有高 度的同源性，在脂质代谢特别是HDL—C代谢过程中起着非常重要的调节作 用。内皮脂酶的主要活性为磷脂酶活性，HDL颗粒是其优先选择的底物。Ishida 等人进行的小鼠体内试验表明，ELmRNA的表达与HDL-C水平之间存在明确的负 著负相关。 内皮脂酶除了参与脂质代谢，它还与炎症反应密切相关。一方面，它参 与内皮细胞黏附分子表达的调控，可能是通过影响内皮细胞黏附分子表达来 参与动脉粥样硬化的病理生理过程的；另一方面，内皮脂酶的表达受到炎症 necrosisfactor，TNF．a)、 反应相关细胞因子的影响，如肿瘤坏死因子a(tumor 可能参与了AS的形成和发展。 目前， 已有少量文献报道了在小样本特定种族人群中关于 变异位点的人群与HDL．C水平相关。然而，在更大范围内的人群中，尚不清 楚这些变异是否与血浆中的脂质水平及冠心病(CAD)相关。事实上，对于 EL的研究尚处于初始阶段，目前关于EL基因多态性研究主要集中在与HDL 胆固醇表型的关系上，而与冠心病关系的研究尚未有大样本报道，并且一些 报道结论还存在不一致。基于以上研究背景，本论文针对居住在北京地区及 其附近省市的中国汉族人群，采用大样本病例．对照的群体关联分析方法，来 3 关性。 研究目的 (1)研究中国汉族人群冠心病患者和正常对照人群中内皮脂酶基因C584T／ex3 和T42C／in5位点的变异情况，比较冠心病患者和正常对照人群之间两个位点基因型 和等位基因频率的差异，探索内皮脂酶基因与冠心病的相关性； 血浆脂质水平的相关性，进而探讨内皮脂酶基因在冠心病发病过程中发挥的作用。 研究方法 科经冠脉造影确诊的冠心病患者941例，正常对照组为年龄匹配的同期协和医院体 检非冠心病人群794例，所有研究对象均为汉族人群。收集并统计分析入组样本的 血糖、血脂、冠状动脉病变情况等临床资料。 分离血浆和血细胞，从单核细胞中提取DNA； 位点进行基因分型，对上述两个位点的基因型进行遗传学分析； (4)对上述基因位点多态性与临床资料进行相关性分析； (5)用ELISA方法测定血浆中内皮脂酶的浓度，与血脂水平进行相关性分析。 研究结果 (1)本论文研究共纳入冠心病患者941例(中位年龄为62岁，男女人数比例 行危险因素分布的比较，发现高血压、糖尿病、高胆固醇血症、吸烟、冠心病家族 史、肥胖、低HDL-C血症的比例在两组之间均有极显著差异，冠心病组均明显高 于对照组。比较冠心病组和正常对照组的血脂、血糖、BMI、UA等计量临床资料， 在显著性差异。 群。 心病组和正常对照组之间无显著性差异； 4 (4)对冠心病患者亚组与对照组进行分析，结果表明内皮脂酶基因C584T／ex3 及T42C／in5两个位点的基因型和等位基因频率，在冠心病合并／不合并糖尿病患者 和对照组之间、冠心病合并／不合并高血压患者和对照组之间、冠心病心梗患者／冠 心病非心梗患者和对照组之间、早发冠心病患者和对照组之间、不同病变支数的冠 心病患者之间以及不同狭窄程度的冠心病患者之间，均无显著性差异。 两个位点的基因型和等位基因频率在冠心病患者对照组之间无显著性差异。 形成3种频率大于3％的单体型； 显示两位点变