冬虫夏草水提物人巨细胞病毒研究.pdf

广西医科大学★硕士研究生论文 冬虫夏草水提物抗人巨细胞病毒研究 冬虫夏草水提物抗人巨细胞病毒研究 摘要 人巨细胞病毒是一种p．疱疹病毒，其在人群中具有较高的感染率，在 普通人群中，均为隐性感染，无临床症状，但是在免疫力低下患者中，如 艾滋病患者、器官移植患者等特殊人群，人巨细胞病毒往往会被激活，从 而导致临床症状，比如视网膜炎、胸膜炎、发烧等。另外，人巨细胞病毒 的隐性感染与胎儿致畸、结肠憩室炎、动脉硬化等密切相关。 目前FDA批准的抗人巨细胞病毒药物较少，且由于这些药物具有肾毒 性、造血抑制、病毒的抗药性、以及低生物利用度等缺点，严重的限制了 临床的使用。所以，有必要继续寻找高效低毒的抗人巨细胞病毒药物。 目的：冬虫夏草是一种名贵的中草药材，含有多种活性成份，比如， 多糖、核苷、甘露糖等；具有多种生物活性，如提高免疫力、抗肿瘤、抗 疲劳、降血糖、清除自由基等。 本研究拟探讨冬虫夏草用于抗人巨细胞病毒的可行性。 方法：首先制备本研究所用的宿主细胞、人巨细胞病毒、以及冬虫夏 草提取物；采用MTT法对提取物进行细胞毒性测试，确定药物对宿主细胞 的无毒浓度；通过噬斑减少试验确定药物抗人巨细胞病毒活性，并确定其 半数抑制量；通过免疫印迹以及对细胞活性的检测，确定其潜在的抗人巨 细胞病毒靶位。 结果：分离培养出了适于本研究用的宿主细胞一人包皮成纤维细胞； 制备出高滴度人巨细胞病毒储备液(2．4X106PFU／IIll)；通过细胞毒性实验， 发现当冬虫夏草水提物浓度≤0．5mg／ml时，对细胞代谢不产生影响；通过 噬斑减少试验，发现冬虫夏草水提物可以有效抑制入巨细胞病毒的复制， ．2． 广西医科大学★硕士研究生论文 冬虫夏草水提物抗人巨细胞病毒研究 提物可以抑制因人巨细胞病毒感染引起的细胞活性升高。 结论：冬虫夏草可以有效抑制人巨细胞病毒的复制，具有较强的抗人 巨细胞病毒活性。研究中发现，其可以抑制IE2／I『I，84的表达，以及削弱IEl 的表达。这些提示冬虫夏草通过抑制这些蛋白的表达，从而达到抗人巨细 胞病毒的活性。 另外，其他研究表明，抑制人巨细胞病毒引起的细胞内生理反应，可 以抑制人巨细胞病毒的复制，在本研究中发现，冬虫夏草可以抑制因人巨 细胞病毒感染引起的细胞活性的改变，这提示，冬虫夏草可以通过抑制细 胞活性的升高，而抑制人巨细胞病毒的复制，但具体机制仍然需要进一步 研究，因为也有可能是由于抑制了IE2舢L84的表达所造成的。 总之，以上研究为进一步从冬虫夏草中分离、鉴定有效的抗人巨细胞 病毒药物，以及作用靶点研究，奠定了基础。 关键词：冬虫夏草，人巨细胞病毒，抗病毒药物，抗病毒活性 广西医科大学★硕士研究生论文 冬虫夏草水提物抗人巨细胞病毒研究 AN兀VIRALACTIVlTIESOFⅥ验舾REXTRACTFROM coRDYcEPSSINENSlSAGA臌SIVK：№N ABSTRACT a kindof Cytomegalovirus)is virus，has HCMV(Human 13-herpes high in cannotleadto clinical prevalencepopulation．Usuallypeople’infection any butas andother manifestation， AIDS，solid-organtransplantation canbe diseasesale immunocompromisedpati