前列腺素e1对阻性黄疸大鼠肝、肾、肠粘膜损害的保护作用及机制.pdf

薛￡乞卜’．’ 中文摘要 前列腺素E1对梗阻性黄疸大鼠肝、肾、肠粘膜损害的 保护作用及机制 摘 要 目的：梗阻性黄疸(Obstructive Jaundice，oJ)是由肝内外胆管狭窄或 闭塞所致的一组常见疾病。胆管梗阻后，由于胆汁及其诸多成分不能流入 肠内，将导致胆管内压升高、肝血流改变以及一系列生化等方面的改变和 多脏器的病理改变。易导致感染和肝、肾等器官功能衰竭，术后并发症和 病死率较高。目前尚无理想的防治方法。探寻减轻梗阻性黄疸病人肝、肾、 肠等脏器损害的方法，对降低病人围手术期并发症及死亡率有重要意义。 方法： 1动物模型制备 。 实验动物术前12h禁食，自由饮水。用10％水合氯醛(O．39／kg)腹腔注 射麻醉，取上腹部正中切口入腹，显露第一肝门，钝性游离并用0号丝线 双重结扎胆总管，造成肝内外胆管完全梗阻，分2层缝合腹壁。假手术组 仅进行腹腔游离，不结扎胆总管。 2动物分组 (sham E1组)(n-10)：动物模型同OJ 胆管完全梗阻；前列腺素E1治疗组(OJ+PG 组， 手术l周后PGE1治疗组大鼠予以前列腺素E1 O．1微克／kg·d)腹腔 内注射， SH组和OJ组大鼠予以相同剂量生理盐水，连续注射14d。手 冰箱内保存备用。切取肝脏、肾脏及末端回肠组织制作标本，用于各种指 ’ 标的检测。 3检测指标 3．1肝功能和肾功能的检测 血清总胆红素、直接胆红素、谷丙转氨酶(ALT)、胆汁酸、肌苷(Cr)、 尿素氮(BUN)采用全自动生化分析仪测定。 中文摘要 3．2血浆内毒素、D一乳酸、TNF．0L、IL．6测定：血浆内毒素采用偶氮显 色法，血浆D一乳酸采用改良分光光度法测定，血浆TNF．仅、IL。6采用放 射免疫法测定。 组织细胞间黏附分子．1)的表达：免疫荧光标记检测NF．rB p65的表达； ICAM．1单克隆抗体检测VCAM．1、ICAM．1表达。 3．4TUNEL法检测肝细胞、肾小管上皮、肠黏膜细胞凋亡：采用凋亡检测 试剂盒，按试剂盒操作说明对石蜡切片进行染色，在光镜下观察5个高倍 视野中阳性细胞百分数，以此作为凋亡指数。 3．5组织形态学检查 肝、肾、末段回肠组织固定于中性甲醛溶液中，常规脱水，石蜡包 埋，切片HE染色后光镜下观察。测量切片肠黏膜厚度、肠黏膜的绒毛高 度各lO次，取其均数。 。 3．6数据处理 采用SPSS10．O统计学软件包，采用t检验、卡方检验等对各表达与 临床病理资料进行相关性分析，实验数据以均数4-标准差(叉士S)表示。P 0．05为有统计学意义，p0．01为有统计学显著意义。 结果： ． l术后生化指标变化 ． 水平在梗阻性黄疸各组都明显高于假手术组；OJ+PGEl组的血清各指标 水平均明显低于OJ组。 2术后血浆内毒素、D一乳酸、TNF．C【、IL．6测定水平在梗阻性黄疸各组 都明显高于假手术组；OJ+PGEl组的各指标水平均明显低于OJ组。 3肝、肾、末段回肠黏膜活化NF．r．B 组织细胞间黏附分子．1)的表达：在SH组各因子表达处于未见表达或仅见 少量表达。oJ组各因子均表达强烈。而OJ+PG组各因子亦有明显表达，但 相较于OJ组则有明显表达减少。 4肝细胞、肾小管上皮、肠黏膜细胞凋亡指数