卵泡激素对卵巢细胞生物学行为的影响及其相关分子机制.pdf

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卵泡激素对卵巢细胞生物学行为的影响及其相关分子机制

卵泡刺激素对卵巢癌细胞生物学行为的影 响及其相关分子机制 中文摘要 卵巢恶性肿瘤是女性生殖器常见的三大恶性肿瘤之一,其中卵巢癌占其 85%--,90%,虽然手术、化学药物治疗、放射治疗等传统治疗手段不断改进,卵 巢癌的治疗效果改善甚微,其5年生存率徘徊于3096-4096,病亡率居妇科恶性 肿瘤之首。 临床上卵巢癌好发于绝经和卵巢切除术后妇女n1,常伴有卵泡刺激素(FSH) 和黄体生成素(LH)的升高;而多次妊娠、母乳喂养、口服避孕药和接受激素替 代疗法的妇女发病风险较低圆,FSIi和LH也较低。近20年来有关研究也表明FSH 对卵巢癌的发生发展起重要作用,但其对卵巢癌细胞生物学行为的影响研究甚 少。本课题研究表明FSH与卵巢癌细胞的增殖、凋亡、迁移、侵袭和血管内皮生 长因子(VEGF)有关联;通过对FSH调控卵巢癌VEGF的相关分子机制、卵巢癌 临床资料和动物实验的研究分析,将有助于卵巢癌的病因研究,为新的治疗药物 和方法的产生提供依据。 本课题共分四部分:①卵泡刺激素对卵巢癌细胞增值、凋亡、迁移、侵袭 和血管内皮生长因子的影响;②卵泡刺激素调控卵巢癌细胞血管内皮生长因子的 相关分子机制;③卵巢癌相关临床资料的分析;④动物实验。 第一部分卵泡刺激素对卵巢癌细胞增值、凋亡、迁移、侵袭和血管内皮生长 因子的影响 目的研究FSH对卵巢癌细胞株SKOV-3和ES-2细胞增殖、凋亡、迁移、 侵袭和血管内皮生长因子的影响。 或2.5X l 比色法分别测定细胞的增殖活性;流式细胞仪分别检测细胞凋亡和细胞周期情 况;明胶酶谱法测定细胞培养上清液中基质金属蛋白酶一2(协妒一2)的活性;双 抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)测定细胞培养上清液中VEGF蛋白的含量; 袭实验检测细胞的迁移侵袭能力。 和ES-2细胞的迁移侵袭能力。 结论FSH可促进卵巢癌细胞株SKOV-3和ES一2细胞增殖、迁移和侵袭, 抑制细胞的凋亡,促进VEGF的表达。 第二部分FSH调控卵巢癌细胞血管内皮生长因子的相关分子机制 目的研究FSH调控卵巢癌细胞血管内皮生长因子的相关分子机制。 x 2.5 survivin、缺氧诱导因子-IQ(HIF-lQ)的表达,分别针对AKT、survivin、 HIF-l Q的表达,采用 用RNA干扰(RNAi)分别抑制细胞中AKT、survivin或眦F_l Western blot检测干扰的效果;同时应用特异性的P13K/AKT通路阻断剂 磷酸化,在无FSH刺激或FsH刺激的条件下,研究相关因素之间的关系。 a的表 2 达明显增强。(2)在无FSH刺激的条件下,survivin或眦F-1 Q的RNAi均可使 SKOV-3细胞的VEGFmRNA及胞浆蛋白表达下降。在FSH刺激的条件下,仅仅 的SKOV-3和ES-2细胞中survivin的上调。 进而促进VEGF的表达。 第三部分AKT和pAKT在卵巢癌组织中的表达 目的探讨pAKT/AKT在不同卵巢癌组织中的表达及其与预后的关系。 方法用免疫组织化学的方法分别检测pAKT/AKT在82例不同卵巢癌组织 (其中21例卵巢浆液性囊腺瘤、18例卵巢交界性浆液性囊腺瘤、26卵巢浆液 性囊腺癌和17卵巢透明细胞癌)中的表达,并用卡方检验和生存分析等了解它 们与卵巢癌预后的关系。 结果与卵巢浆液性囊腺瘤相比,卵巢浆液性囊腺癌pAKT和AKT的阳性表 达率更高(尺O.01),pAKT和AKT的表达与肿瘤分化程度、2年和5年生存率有关 联,生存分析也表明pAKT和AKT表达阳性的卵巢浆液性囊腺癌患者5年生存率 of of 分别为1596(320)和14.3%(321),pAKT和AKT

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