双源ct灌注成评估胃癌肿瘤血管生成及其生物学行为的临床应用研究.pdf

·中文论著摘要· 双源CT灌注成像评估胃癌肿瘤血管生成及 其生物学行为的临床应用研究 刖 罱 胃癌发病居恶性肿瘤前列，我国每年死于胃癌的人数约有16万人。因此，关 于胃癌的诊断、治疗和生物学行为的研究一直是人们关注的焦点。在拟行根治性 胃大部分切除术之前能否对胃癌细胞的分化程度、胃壁浸润深度、局部淋巴结转 移及远隔转移等情况做出准确、客观的评估具有重要的实际意义。常规的影像手 段在此方面虽然起到了积极的作用，但还有一定的限度。 肿瘤血管生成与肿瘤的生长、浸润、转移和预后关系密切，是目前基础医学 研究的热点。VEGF是反应肿瘤血管生成重要的分子生物学指标，MVD是评价肿 瘤血管生成的金标准，但由于它们的测定需要获得病理组织，操作过程复杂，有 一定的创伤性，在临床工作中较难推广应用，因此迫切需要一种无创、方便、快 捷的肿瘤血管生成检测方法，用以客观、科学的评估肿瘤的生物学行为。 灌注是指血流通过毛细血管网将携带的氧和营养物质输送给组织细胞的过程， 在一定程度上能反映器官、组织的血流动力学状态和功能情况。通过CT来直观显 示活体灌注过程并作定量分析的方法称为CT灌注成像。CT灌注成像是指在静脉注 射对比剂的同时对选定的层面进行动态扫描，以获得该层面内每一像素的时间一 密度曲线，所反映的是对比剂在该器官中浓度的变化，进而间接反映组织器官内灌 注量的变化。CT灌注成像因其具有能更合理地评价肿瘤血管生成及肿瘤生物学行 为的潜能，在肿瘤的影像学研究中越来越受到重视。 肿瘤血管生成能够引起血容量、血流量及毛细血管通透性的变化，CT灌注成 像能Ic．,很z好的反应这些改变，在肿瘤的定量、定性研究中具有广阔的应用前景。 目前，灌注成像在空腔脏器报道很少，尚处于起步阶段，其应用价值有待于 进一步的研究。因而，拟在此方面开展一系列深入的研究工作。研究胃癌灌注参 数与肿瘤血管生成及肿瘤生物学行为的关系。 材料与方法 1、临床资料与病例分组 收集中国医科大学附属第一医院2008年6月、一2008年10月期间收治的胃腺癌 病人69例。其中男49例，女20例，年龄41．79岁，平均58岁。根据术后病理肿瘤细 胞分化程度将病例分为：低分化腺癌组(24例)，低中分化腺癌组(13例)，中分化腺 癌组(12例)，中高分化腺癌组(6例)；依据胃壁浸润深度，将病例分为肌层浸润 组(26例)，浆膜浸润组(16例)，浆膜外组(13例)；根据局部淋巴结有无转移分 为淋巴结转移组(29例)、无淋巴结转移组(26例)；根据有无远隔转移及术后近 期远隔转移分为远隔转移组(14例)，近期远隔转移组(8例)，无远隔转移组(47 例)。 2、检查方法 练，扫描时屏气扫描。先行常规CT平扫，确定灌注扫描的靶层面，然后用高压注 射器经肘静脉注射对比剂欧乃派克50ml，注射速率6ml／S，注射后同速度跟注等量 生理盐水，注射开始后10s，采用西门子双源CT体部灌注扫描序列对病人实行灌注 扫描，覆盖范围28．8mm，扫描时间为40s。 3、图像处理及分析 将扫描获得的图像传至西门子图像工作站进行分析。通过最大斜率法获得血 容量、血流量、达峰时间、灌注开始时间等参数及相应的功能图。通过Pmlak肿 瘤灌注模型获得Pmlak血管通透性图、Patlak血容量图等功能图及其具体参数数 值。感兴趣区直径控制在lcm以内，并且避免肉眼可辨认的血管影、液化坏死区 及气液交界产生的伪影区等影响测量准确性的部位。 4、标本的取材、处理和免疫组化染色 获取行胃大部分切除术患者的手术标本，制作石蜡切片，采用鼠抗人CD34单 克隆抗体、兔抗人VEGF单克隆抗体，对组织切片进行免疫组化染色。手术标本的 取材部位选择在肿瘤灌注区域，胃粘膜组织取材选择在距离癌灶边缘4cm，病 2 理证实为非肿瘤组织的癌旁胃粘膜组织。所有标本以10％甲醛固定，石蜡包埋，4岬 厚连续切片5张，除1张做常规HE染色外，余片分别用CD34、VEGF单克隆抗体行 免疫组化染色。阳性对照用已知阳性片，用0．01mol／L的PBS代替一抗作为阴性对 照。 5、结果判定 MVD的测定按热点法进行：切片先置于10x10倍光学显微镜下确定被 CD34染成棕色的肿瘤最高血管密度区域，然后置于20x1