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同种异体nk细对骨髓瘤rpmi 8226细胞杀伤活性的体外研究
同种异体NK细胞对骨髓瘤RPMI8226细胞杀伤活性的体外研究 中文摘要
同种异体NK细胞对骨髓瘤RPMI8226细
胞杀伤活性的体外研究
中山大学孙逸仙纪念医院内科
硕士研究生 王秀菊
导 师 尹松梅教授
中文摘要
背景与目的
多发性骨髓瘤(multiplemyeloma,MM)是浆细胞恶性增生性疾病,约占血
液恶性肿瘤的10%。单药用于难治性MM效果欠佳,大多数单药化疗的有效率
非常低。联合化疗以及新的药物如沙利度胺和硼替佐米的使用仍达不到理想的疗
效。自体造血干细胞移植虽可使部分患者病情缓解,但费用高,最终疾病仍要复
发。异基因造血干细胞移植是治愈MM的根本手段,但因患者年龄较大、缓解
率低、缺乏HLA相合的供者,移植相关病死率高,限制了它的应用。由于上述
原因,到目前为止,MM仍被认为是不可治愈的疾病。因此,临床需要寻找治疗
骨髓瘤的新方法。自体干细胞移植后输注KIR(抑制性杀伤细胞免疫球蛋白样受
killercell
体inhibitoryimmunoglobulin—likereceptor,KIR)一错配的异基因自然杀伤
Natural
细胞(A1lo—reactiveKiller,Allo—NK)作为新的生物治疗方法可以
清除残留的肿瘤细胞,避免移植后疾病复发,延长生存期。
在异基因造血干细胞移植中,同种异体反应性自然杀伤细胞有提高白血病
治愈率的作用。最近研究显示,Allo-NK细胞对原代的胃癌、恶性黑色素瘤、肾
癌、肠癌和卵巢癌细胞也有杀伤作用。但是,Allo-NK细胞对骨髓瘤细胞的作用
尚待研究。
NK细胞是遗传性免疫系统的主要效应细胞,对病原感染的或变异的细胞具
同种异体NK细胞对骨髓瘤RPMI8226细胞杀伤活性的体外研究 中文摘要
有自然细胞毒效应,NK细胞表面表达的受体与靶细胞表面的配体通过遗传模式
识别发挥效应。NK细胞对靶细胞的杀伤活性与其细胞表面的受体和靶细胞表面
的配体密切相关。NK细胞表面的抑制性杀伤细胞免疫球蛋白样受体(inhibitory
killercell
immunoglobulin—like
结合,介导对NK细胞毒活性的抑制效应,靶细胞缺乏KIR特定的配体将激发
NK细胞对其杀伤活性。NKG2D是NK细胞表面的主要活化性受体;其配体为
classIchain.relatedmoleculeAor
MHC.I类链相关分子A或B(MHC B,MICA/B)
及人巨细胞病毒ULl6蛋白的结合蛋I兰l(human ULl6
cytomegalovirusglycoprotein
binding
的相应配体结合,介导NK细胞的杀伤效应。异基因造血干细胞移植中,当存在
供者到受者方向的抑制性杀伤细胞免疫球蛋白样受体.配体错配时,供者的同种
反应性NK细胞介导的抗白血病效应可以防止白血病复发。体外实验证实NK细
胞能抑制慢性粒细胞白血病患者白血病CD34+细胞形成粒细胞巨噬细胞集落形
成单位,表明NK细胞对白血病细胞和白血病克隆形成细胞具有杀伤效应。有研
究证实,KIR-配体错配的NK细胞可有效地杀伤原代的胃癌、肾癌、肠癌、卵
巢癌肿瘤细胞,而无KIR-配体错配的NK细胞不具有杀伤活性。
依据骨髓瘤的起源、病因、发病机理、生物学行为和对NK细胞功能的揭
示,本研究以人骨髓瘤RPMI8226细胞和Allo-NK细胞混合培养为反应体系,
骨髓瘤RPMI8226细胞的杀伤活性;②其相关分子基础是什么;③能否通过调
节,提高RPMI8226细胞对Allo-NK细胞的杀伤敏感性。本研究旨在寻找新的
骨髓瘤牛物治疗方法,并其提供理论和实验依据。
方法
第一部分人骨髓瘤RPMI8226细胞的生物学特性
观察光镜下RPMI8226细胞形态、生长特
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