同源内皮祖细胞大鼠糖尿病溃疡模型影响的实验研究.pdf

中山大学博士论文 同源内皮祖细胞对大鼠糖尿病溃疡模型影响的实验研究 同源内皮祖细胞的培养对大鼠糖尿病溃疡 模型影响的实验研究 学科专业：外科学烧伤外科学 博士研究生： 朱 斌 指导教师：朱家源教授 中文摘要 随着糖尿病发生率的不断增高，糖尿病皮肤溃疡也日益成为外科 医生共同关注的焦点之一。其中，溃疡发生的部位以足部为多。国际 糖尿病足病工作组(1wGDF)将糖尿病足病定义为糖尿病患者踝以下 累及全层皮肤的创面，而与这种创面的病程无关。糖尿病是目前全世 界第三大常见疾病(心脏血管病、肿瘤、糖尿病)，国外，糖尿病患者 并发糖尿病足的机会高达15％，中山大学附属第一医院的一项临床研 究显示，住院糖尿病患者并发糖尿病溃疡的发生率达到了2．058％。 糖尿病足也成为皮肤慢性溃疡的重要组成及代表。 糖尿病足给病人及社会带来了沉重的经济负担。据文献报道，在 美国，糖尿病性足部溃疡每年费用达15亿美元，在英国每年用于糖 尿病足溃疡的治疗的费用达1．7亿英镑，这些费用仅包括换药治疗和 社区医护人员支出，而并不包括由此而来的病人生活质量下降、经济 受损等后果；在国内，虽然没有关于类似的统计资料，但随着糖尿病 足的发病率逐年上升，医院及社会在此方面的支出也在逐年增长。 中山大学博士论文 同源内皮祖细胞对大鼠糖尿病溃疡模型影响的实验研究 糖尿病足不仅增加了病人和社会的经济负担，而且，糖尿病溃疡 创面的存在，轻则增加病人痛苦，影响正常工作和生活；重则危及生 命。大面积溃疡创面的存在，可以影响机体的代谢、营养和免疫功能， 甚至招来致命性的全身性感染。由于血液供应差，且多有神经病变， 糖尿病足溃疡伤口愈合缓慢、临床治疗困难。出现坏疽机会较正常人 群为高，往往需要进行截肢手术。而有些病人截肢后伤口仍不能愈合， 不得不接受再次截肢手术。据统计，一侧截肢的病人在第2年对侧肢 体截肢率高达30％，造成病人极大痛苦。因此促进溃疡愈合，尽快地 封闭创面，是临床治疗中的重要课题。 随着对创面愈合认识的深化，人们认识到，打破慢性创面的停滞 状态，使病理愈合模式向生理愈合模式转变，是治疗慢性创面的基本 原则；治疗工作及研究己从被动等待状态转向主动调控。 近年来，随着对创面愈合过程的不断深入，学者们纷纷认识到， 打破慢性创面的停滞状态，启动创面的愈合的过程，需要针对创面不 同的原发病，以及针对创面的不同时期，进行有针对性的治疗。本世 Bed 纪初，美国学者首先提出来“创面床准备(Wround Preparation， WBP)”理论，成为创面处理理论方面的里程碑。本课题组在既往的 工作中，运用WBP理论，已做了大量有益的尝试，取得了一定的成绩。 本课题即是在此背景下，在以往的工作基础上，对WBP理论指导 创面治疗进行有益的尝试。 中山大学博士论文 同源内皮祖细胞对大鼠糖尿病溃疡模型影响的实验研究 实验目的： 本研究将在既往研究的基础上进一步研究：1、在充分创面床 准备条件下，体外诱导及培养大鼠外周血单个核细胞为内皮祖细胞 Cell，EPC)，并将同源内皮祖细胞移植于大 (EndophilialProgenitor 鼠糖尿病溃疡创面对愈合的影响。2、胰岛素样生长因子(InsuliIl—like 备。 实验方法： 本实验共分二部分。 第一部分：同源内皮祖细胞(EPC)移植于大鼠糖尿病溃疡创 面对愈合的影响。①大鼠外周血内皮祖细胞的体外诱导及鉴定：用 lO 2 到的细胞置于含10％FCS、ⅦGF ng．L～、bFGFng．L。1的DMEM 培养基中培养，以Flk-1和vw因子的免疫荧光鉴定培养细胞；②糖 尿病溃疡大鼠动物模型