天然麝香对大鼠经干细胞增殖、分化和凋亡影响的实验研究.pdf

：蕉丛短丕堂翅羔笠缝趁窑 中文摘要 目的：通过实验了解天然麝香对神经干细胞存活、增殖、分化、凋亡的影响，为天 然廉香在缺血性脑血管病中的应用提供理论基础，并为神经干细胞的临床应用提供试验 依据。 方法：从新生大鼠海马组织分离出神经干细胞，进行神经干细胞原代培养、传代培 养、免疫组织化学法和荧光法做nestin染色鉴定，传代三次后进行分组实验。实验分 组： (1)无血清培养组(A组)；(2)无血清培养加天然麝香组(B组)；(3)缺 氧无血清培养组(C组)； 通过nestin染色的神经干细胞以计数方法来观察各时间点神经干细胞的存活和增殖；通 过免疫组化计数各时间点的MAP．2、GFAP、GC阳性细胞数来观察神经干细胞向神经 元、星形胶质细胞和少突胶质细胞的分化情况；以各时间点Caspase免疫荧光阳性细胞 来观察神经干细胞的凋亡情况。SPSS统计学处理。 结果： NSCs形态学观察及鉴定：．原代分离的单细胞3d增生为神经细胞球，传代后，经 nestin免疫荧光染色，细胞球呈阳性。A组和B组比较观察：随着培养天数的增加，B 组细胞数明显多于A组，且细胞团大，细胞折光性强，并有少量细胞贴壁，有突起形 成；后期细胞突起较长，较早形成网格，且密集。B组nestin阳性细胞数高于A组 荧光阳性细胞数在各个时间点A组均高于B组(Po．05)。 C组和D组比较观察：随着培养天数的增加，D组细胞数多于C组，且C组细胞 折光性差，出现很多细胞碎屑， D组出现细胞分化贴壁，突起形成。早期D组nestin f’ Caspase荧光阳性细胞数在各个时间点C组均明显高于D组(P0．01)。 结论： 1．天然麝香可以促进体外培养的神经干细胞的增殖，分化。 2，在缺氧情况下，天然麝香对神经干细胞具有保护作用，增加其存活，减少其凋 亡。促进神经干细胞分化。 主题词：天然麝香神经干细胞增殖分化凋亡 2 Abstract 1 ofNatural ne，eXpemn酬studymuskiness on and ofrat apoptosisneural stemcells invitro ubjectiVe：‘Ib mlders咖dthe effect ofNatural muskinesson survival， proliferal=ioIl’ and ofthe apoptosisneuralstem the d1场删ation cells(NSCs)．ProvidingtheoreticmbaSisfor tjle印p11catlonnalllral