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小鼠脑撞击伤后不同时相神经可塑性相关物质Nogo—A及GAPd3的表达 小鼠脑撞击伤后不同时相神经可塑性相关物质 Nogo—A及GAP．43的表达 硕士生：李又福 导 师：刘雁教授 专 业：神经病学 摘要 脑外伤是临床上的一类多发病，常引起严重的神经功能障碍。中枢神经可塑 性与脑外伤后的脑功能恢复密切相关。哺乳动物成熟中枢神经系统损伤后缺乏有 效再生，目前倾向于将其归结于损伤部位的牛理、生化和分子生物学环境的改变。 这些因素包括生长促进因子的缺乏、损伤部位疤痕的形成、生长抑制分子的存在、 离断神经元的轴突溃变和损伤所促成的内外源性理化因素改变等。近年来的研究 显示，如能有效阻断神经生长抑制因子和提高神经生长促进因子的作用，可明显 促进损伤后的中枢神经再生。 3A，硫酸软 作用于CNS的牛长抑制分子包含细胞外基质蛋白如semaphorin 少突胶质细胞髓鞘糖蛋白(OMgp)。其中Nogo．A的作用最为关键。它可能作为 一种多功能的信号分子在诸如轴突外向性生长，细胞的存活或死亡的判定以及突 触的可塑性这种种功能中起作用。因此，Nogo—A与成年哺乳动物CNS损伤后的 轴突再生和代偿塑性的限制作用有关。 Associated GAP一43(又名B一50，Fl，神经调素)是生长相关蛋白(Growth Proteins，GAPs)家族中的重要的一员，为神经组织特有的一种磷酸蛋白，特异性分 布于突触前膜上，特别是在生长、分化及再生的轴突末端含量最高，对神经的牛长、 发育、再生以及突触功能的维持和递质的释放都起着重要作用。GAP-43被认为 是神经元生长期的内在决定因子，可作为神经再牛的标志。 小鼠脑撞击伤后不同时相神经可塑性相关物质Nogo-A及GAP．43的表达 目的：本实验观察神经生长抑制因子Nogo．A及促生长因子GAP．43在小鼠实验 brain 性weigh．dropinjury后损伤灶周不同时点表达的变化，探讨Nogo—A及 brain GAP43在weigh-dropinjury后对神经再生的作用。 brain 方法：利用weigh-dropinjury脑撞击装置，复制外伤性脑撞击伤小鼠模型， 采用实时荧光定量PCR技术，在小鼠外伤性脑损伤后第l、7、14和28天分别 检测损伤灶周大脑皮层Nogo．A及GAP．43的表达量，同时用免疫组织化学技术 观察Nogo．A及GAP-43在大脑皮层的阳性信号，来印证荧光定量PCR结果。 结果： 一．脑撞击伤后小鼠大脑皮层Nogo．AmRNA的表达(荧光定量) 较假手术组相应时相点1．00±0．21、1．19±0．20、1．Ol4-0．34明显升高 mRNA表达第1天先下降，后呈上升趋势，第14天达 (pO．05)。手术组Nogo-A 到高峰，第28天下降，但高于假手术组，手术组之间相比有显著性差异(P0．01)。 mRNA的 假手术组组间没有差异(pO．05)，说明开颅而不损伤脑组织对Nogo—A 表达几乎没有影响。 二．脑撞击伤后小鼠大脑皮层GAP-43mRNA的表达(荧光定量) 的拷贝数)在第l、7天分别为1．304-0．15、1．884-0．22，均较假手术组相应时问 点0．91 较假手术组同时相应点0．984-0．16明显升高(p0．05)；脑撞击伤后第28天为1．02 ±0．1 5，与假手术组同时相点I．06±0．10相比无明显差异(pO．05)。手术组 GAP_43mRNA表达在脑损伤后逐渐上升，第7天达到高峰，然后逐渐下降，第 28天降至假手术组水平，手术组之间比较有显著差异(P0．0I)。假手术组之