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尿嘧啶脱氧核苷resovist双标记骨髓基质细胞移植治疗帕金森病大鼠的实验研究
尿嘧啶脱氧核苷和Resovist双标记骨髓基质细胞移植治疗帕金森病大鼠的实验研究 中文摘要
疗帕金森病大鼠的实验研究
中文摘要中又捅斐
帕金森病(Parkinson’Sdisease,PD)是一种常见的中枢神经系统变性疾病,主要
的病理改变是中脑黑质投射到纹状体的多巴胺能神经元进行性缺失,引起黑质纹状体
系统多巴胺水平降低。服用左旋多巴制剂的多巴胺替代治疗至今仍是早期最为有效的
治疗方法,但其只是症状性治疗,远期疗效欠佳,出现严重的副作用,包括症状波动、
异动症以及精神症状。细胞移植替代补充缺失的多巴胺能神经元,是目前帕金森病治
ventral
疗的策略之一,其中胚胎腹侧中脑(fetal
取得了成功,但是由于伦理束缚和来源限制,不能够得到广泛应用。骨髓基质干细胞
(bonemarrowstromal
cells,BMSCs)是骨髓内的一种多潜能干细胞,在一定的条件
下,可以分化为神经细胞。而且它可以直接从个体骨髓中获得,来源充足,取材方便,
且避免伦理学的束缚。因此BMSCs是治疗帕金森病理想的种子细胞。
帕金森病黑质多巴胺能神经元变性的原因目前还不明确,然而大量的研究资料提
示,其主要与氧化反应增强、线粒体功能异常等因素有关。谷胱甘肽作为脑内最重要
的抗氧化剂,PD中还原型谷胱甘肽(reducedhormone,GSH)含量降低,
glutathione
并与其疾病的严重程度相关。应用GSH治疗早期PD己取得了一定的疗效。体外实验
表明GSH可诱导BMSCs分化为神经组织细胞。
检测BMSCs在脑内的迁移及细胞的分化。并通过GSH干预,探讨联合应用骨髓基
质细胞和还原型谷胱甘肽治疗帕金森病大鼠的疗效和机制。
第一部分 尿嘧啶脱氧核苷和Resovist双标记骨髓基质细胞移植帕金森
病大鼠后细胞迁移范围研究
尿嘧啶脱氧核苷和Resovist双标记骨髓基质细胞移植治疗帕金森病大鼠的实验研究 中文摘要
目的:
纹状体内,通过阿朴吗啡诱发旋转试验评价最佳移植数量,通过磁共振活体示踪、免
疫组化检测BMSCs在脑内的迁移范围。
大鼠脑内。根据每注射点细胞数量及细胞是否铁标记,36只PD大鼠随机分成5组:
发旋转试验和MⅪ动态示踪,第9周处死大鼠,进行Brdu免疫组化确定移植后细胞
迁移范围。
结果: (1)阿朴吗啡诱发旋转试验2.0×105移植组阿朴吗啡每分钟旋转次数降
序列上可见移植区明显的低信号改变,并随着时间的推移发生广泛迁移,以第四周迁
移最明显。(3)Brdu免疫组化:BMSCs移植后不但向周围纹状体组织近距离地迁移,
而且沿着胼胝体、室管膜发生广泛的迁移。
结论:
现,细胞迁移的结果最优。
关键词 骨髓基质细胞; Resovist;帕金森病; 纹状体; 尿嘧啶脱氧核苷
第二部分 尿嘧啶脱氧核苷和Resovist双标记骨髓基质细胞移植帕金森
病大鼠后细胞分化研究
目的:
通过免疫组化双染和实时荧光定量PCR检测移植后细胞的分化方向。
鼠右侧纹状体内,根据每注射点细胞数量以及细胞是否铁标记,36只PD大鼠随机分
后细胞分化,并运用实时荧光定量PCR进行定量检测。
尿嘧啶脱氧核苷和Resovist双标记骨髓基质细胞移植治疗帕金森病大鼠的实验研究 中文摘要
结果:免疫组化双染:移植的BMSCs可以向星型胶质细胞、神经干细胞、成熟神经
元以及多巴胺能细胞分化,以向星型胶质细胞的分化相对较多。(3)荧光实时定量PCR:
2.O×105移植组GFAP、Nestin、NSE及THmRNA的转录水平均为最高。五组之间只有
mRNA、NestinmRNA、NSEmRNA、THmRNA
2.O×105移植组和1.5×105移植组GFAP
的转录水平较对照组有统计学差异,其余各组与对照组比较无统计学差异。
结论:BMSCs移植后可以分化为功能性的神经细胞,以2.0x105移植组分化的结果
最优。
关键词骨髓基
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