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尿酸对腹膜间皮细胞增殖及表达炎症因子的影响 尿酸对腹膜间皮细胞增殖及表达炎症因子的影响 中．文摘要 估计全人类有一百多万人遭受终末期肾脏疾病的折磨，而且这类患 者正在以每年6．7％的比例增加，治疗选择包括腹膜透析、血液透析和肾 脏移植。腹膜透析(peritonealdialysis，PD)是慢性肾功能衰竭的重要替 代治疗方法之一。与HD相比，PD在开始透析的3-5年内总体生存率方面 优于HD；患者在家自行完成；不用打针；更好的清除中分子毒素；PD能 更好地延缓残余肾功能下降；PD患者移植肾功能恢复延迟发生率低；获 得血源性病毒感染的危险性较小。因此，有学者认为PD应占透析总人数 用PD方式，而我国大陆PD患者仅占透析治疗的10％左右。因此，PD在我 国有非常广阔的发展前景。但PD发展也存在制约因素，CAPD患者还存 在腹腔局部的慢性炎症状态，介导腹膜纤维化的发生，腹膜纤维化导致 的超滤功能丧失是维持性腹膜透析患者退出的主要原因。 临床中我们注意到，Q谨D患者存在高尿酸血症，患者腹膜透析灌洗 液中尿酸水平增高，异常尿酸水平，能否影响腹膜的超滤功能呢?而有 关尿酸致病的研究有很多报道，血尿酸水平与痛风发病率呈正相关；血 清尿酸水平增高是影响中重度慢性心力衰竭患者预后的一项独立的预测 指标；尿酸可明显促进VSMC细胞增殖；可溶性尿酸可以促进炎症反应。 但目前还不清楚尿酸是否参与腹膜间皮细胞的激活，从而产生炎症、致 纤维因表达，导致腹膜纤维化。鉴于上述原因，我们设想尿酸可介导腹 尿酸对腹膜问皮细胞增殖及表达炎症因子的影响 膜间皮细胞的激活，此类研究尚未见报道。腹膜间皮细胞表达细胞因子、 趋化因子在腹膜炎及腹膜纤维化进展过程中起着十分重要的作用。目前 尚无有效的解决办法。过氧化物酶增殖物活化受体--y(peroxisome activated proliferator 间皮细胞结构性表达PPAR-7受体，受脂多糖(LPS)刺激后表达上调， 示PPAR-Y可能通过负性调节炎症介质分泌而参与腹腔局部防御。 本研究拟通过建立体外培养的HPMC，分别不同浓度的尿酸刺激 (HPMC)影响的作用及PPAR-丫受体激动剂对尿酸效应的干预。 第一部分尿酸对腹膜间皮细胞(HPMC)增殖、损伤的影响 目的：观察尿酸在体外对人腹膜间皮细胞(肿MC)增殖的影响。研 究尿酸对HPMC作用的时间一效应及剂量一效应关系、尿酸对HPMC的 损伤作用，探讨尿酸对HPMC的作用机制。方法：1、细胞培养及分组： h， 待生长状况良好的HPMC株60．80％细胞贴壁后，无血清培养基同步24 然后根据分组给予相应的刺激。HPMC给予不同浓度和时间尿酸刺激。2、 umol／L浓 度的尿酸刺激24、48、72h后HPMC增殖情况；同时采用乳酸脱氢酶测 定试剂盒，检测培养液中乳酸脱氢酶(LDH)水平，从而确定最佳尿酸 浓度。结果：1、与刺激前比较，尿酸在200--一1000umol／L作用浓度范围 4 尿酸对腹膜问皮细胞增殖及表达炎症因子的影响 内，抑制HPMC增殖；与对照组比较，不同程度地抑制HPMC增殖，随 尿酸浓度增高、作用时间延长，其抑制增殖作用明显(PO．05)，有统计 学意义。2、与对照组比较，不同浓度的尿酸皆使HPMC培养液中LDH 水平增高，尿酸在600--1000umol／L作用浓度范围内，LDH水平增高明 显，呈剂量、时间依赖效应，差异均有显著性伊0．05)。结论：尿酸能够 抑制HPMC细胞增殖、诱导HPMC损伤，呈剂量、时间依赖效应。 第二部分罗格列酮对尿酸致腹膜间皮细胞(HPMC)，增殖、 损伤的干预作用 目的 观察PPAR-7激动剂罗格列酮对尿酸致腹膜间皮细胞 (HPMC)增殖、损伤作用的影响。方法：1、细胞培养及分组：待生长 状况良好的HPMC株60．80％细胞贴壁后，无血清培养基同步24h