应激及炎症因素干眼发病中的作用.pdf

应激及炎症W素在T．眼发病【{l的作用 f|文摘要 应激及炎症因素在干眼发病中的作用 专 业： 眼科学 博士研究生： 林辉 导 师： 刘祖国教授 中文摘要 干眼足一类受到多种因素影响的疾病，发病机制复杂，目前受到较广泛认可 的是眼表一泪液分泌神经反馈环路的干眼发病学说。眼表上皮细胞作为眼表面 的首道『-并障，是维持眼表正常的关键结构，也是干眼发病中的主要效应组织， 其改变在不同类型干眼中具有较高相似性。关于机体的应激及免疫炎症因素在 干眼发病中的具体作用及其引起的眼表．泪腺功能单位的改变尚需要进一步深入 研究。 本课题就上述问题进行了以下研究： 第1章：水液缺乏性千眼患者角膜上皮层内炎症细胞 的分布及密度研究 目的：探讨水液缺乏性干眼患者角膜上皮层内炎症细胞的形态、分布、密度及其 与泪液功能异常问的相关性。 方法：选择46例(46眼)水液缺乏性干眼患者，其中32例(32眼)为非 中央部及周边部角膜上皮层1内Langerhans细胞(LC)以及白细胞的分布、形态及密 I 度，同时对这些受试者进行泪膜破裂时间(TFBUT)、泪液分泌(Schirmer 试验)、荧光素角膜染色观察，通过多因素回归分析探讨角膜上皮层内炎症细 胞分布特点与干眼临床特点之间的相关性。 廊激及炎症闪素存T．眼发病中的作用 巾文摘要 结果：正常对照者中央区及周边部角膜上皮层内存在一定数量LC，其密度分别 为34．9±5．7 cells／mm2及90．7±8．2cells／mm2；而水液缺乏性干眼患者角膜上皮层 内的LC密度均明显增高，以中央角膜上皮层内最为显著。其中，NSS患者中央 区角膜上皮层内LC数量为89．8±10．8 cells／ram2。此外，LC细胞的形态与正常对照相比较，水液缺乏性干眼患者的LC 中具有多个突起以及长突起的LC比例明显增高。正常对照组角膜上皮层内白细 胞数目很少，而水液缺乏性干眼患者角膜上皮内白细胞数量明显增高。统计学 分析显示，角膜上皮层内LC以及白细胞这两种炎症细胞密度与干眼临床检查所 示的干眼炎症程度呈明显正相关。 结论：水液缺乏性干眼患者角膜上皮层内LC以及白细胞的改变提示其可能参与 干眼发病。激光共焦角膜显微镜动态观察中央角膜上皮细胞层内炎症细胞的分 布、密度可以用于辅助监测干眼严重程度并帮助指导治疗。 第2章：液气界面法培养人结膜组织块建立的体外模型 目的：探讨液气界面法培养人结膜组织块所建立的体外模型的病理学特征。 方法：将球结膜组织块分别用液气界面培养法及培养基浸没法培养2周。进行 ， 胞的变化，应用TUNEL法检测结膜组织块内的凋亡细胞，应用ELISA法检测 培养体系中的炎症因子MMP9，TNF．Q和lL．1B浓度变化。 结果： 液气界面法(AL组)培养l周以上的人球结膜组织块具有多项干眼类似的 病理学特征。干燥应激后结膜上皮细胞出现明显复层化增加，而这一现象不出 现在培养基浸没组(su8组)。AL组结膜上皮的K19表达下调，表层上皮细胞出 现K10阳性表达，说明其出现向角化上皮的异常分化。同时，Pax6的核内染色 在液气界面培养2天开始即出现明显下降，表现为核周染色或胞浆染色。组织 块体外培养4天起结膜上皮的MUC5AC表达明显减弱，lO天后完全消失。AL 组MUCl9的成胶型粘蛋白形式的表达从培养后2天即消失，而膜结合型形式 的表达也随培养时间延长逐渐减弱。两组MUC4和MUCl6染色均失去了正常 对照组的全层表达的形式。AL组培养2天起结膜上皮以及基质细胞出现凋亡阳 IT 应激及炎症因素在下眼发病l{】的作用 I}|文摘要 性细胞，且培养10天后明显增多。AL组条件培养基内炎症介质MMP．9，TNF． Q和IL